| 查看: 7919 | 回复: 26 | ||||||||||
ssyyll1019铜虫 (小有名气)
|
[交流]
【请教】纳米金 DNA修饰已有8人参与
|
|||||||||
|
大家好，在做DNA 修饰纳米金颗粒的过程中碰到一些问题，再次想请教写各位前辈们。 1.dna与纳米金连接时 需要一定量的TCEP作为巯基得的还原剂，不少文章都注明了TCEP 不能过量很多，请问TCEP过量对dna 的连接会有怎样的影响？ 2.对于粒径14nm的胶体金颗粒，连接DNA前后 可以通过什么方法可以叫直观的验证DNA确实连接上了？ 谢谢各位！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 DNA RNA | abc5710110 | 和毕设有关的 | 收藏 |
| 电化学 | 实验体系一 | 金、磁珠与抗体的结合 |
» 猜你喜欢
无机化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有238人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
纳米金与DNA反应 迅速变色
已经有12人回复- 请问有人用DLS动态光散射测定过纳米金粒径吗？
已经有10人回复
- 纳米金连接DNA
已经有4人回复
- 请教巯基DNA和纳米金反应具体的操作步骤
已经有11人回复
- 纳米金与巯基DNA的修饰相关问题
已经有5人回复
- [求助]如何定量测定纳米金上修饰的DNA的浓度?(DNA不使用荧光标记)
已经有10人回复
- 请教DNA带什么电？如何跟纳米金结合
已经有7人回复
- 关于DNA修饰金纳米粒子过程中逐步增加NaCl的作用
已经有5人回复
- 纳米金紫外吸收
已经有8人回复
- 纳米金胶离心后加缓冲液聚沉，请问应该怎么解决？？？
已经有48人回复
- 求助：如果纳米金外层包覆一层聚合物，做紫外会有金的吸收峰存在吗？
已经有7人回复
- 硫醇修饰纳米金颗粒
已经有8人回复
- 金纳米棒表面用PSS修饰之后会不会影响Au-S键的连接
已经有10人回复
- 请问纳米金使用BSA或PVP稳定后还可以使巯基DNA固定在表面吗？
已经有6人回复
- 购买的SS-DNA好像有问题，怎么办？
已经有27人回复
- 【求助】纳米金颜色
已经有9人回复
- 【求助】怎么计算纳米金溶液的浓度
已经有8人回复
- 【交流】请问合成的纳米金是什么颜色？
已经有5人回复
- 【求助】金纳米棒的表面修饰
已经有12人回复
- 【求助】胶体金标记DNA的问题
已经有14人回复
xiaoming8831
新虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 1226.6
- 散金: 136
- 红花: 11
- 帖子: 771
- 在线: 496.4小时
- 虫号: 632939
- 注册: 2008-10-22
- 专业: 生物化学
★
ssyyll1019(金币+1):谢谢参与
ssyyll1019(金币+2):谢谢！ 2010-11-18 13:51:58
ssyyll1019(金币+1):谢谢参与
ssyyll1019(金币+2):谢谢！ 2010-11-18 13:51:58
|
第一个问题：TCEP是一种巯基还原剂，就是说能够避免两条DNA之间的巯基形成二巯基，从而不能与金表明发生Au-S反应，但是加多了的话，又会使Au-S键发生还原，从而使已经标记上去的DNA被还原下来。 第二个问题：想知道金颗粒是否连接上DNA相当简单，你按照实验步骤做，如果到最后一步离心用带100毫摩尔盐的缓冲液重悬，你的金颗粒还是红色的，没有发生聚集就表明连接上去了，因为在盐老化的过程中，如果你的金颗粒没有标记上DNA的不会稳定的，就会聚集了。 |
6楼2010-11-17 18:43:38
25楼2018-05-25 14:33:10
erru521
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2614.4
- 散金: 27
- 帖子: 183
- 在线: 59.5小时
- 虫号: 1347380
- 注册: 2011-07-16
- 性别: GG
- 专业: 临床检验新技术
17楼2011-07-18 19:35:40
9楼2010-11-25 14:26:41
10楼2010-11-25 14:41:43
labladycheng
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 252.9
- 散金: 5
- 红花: 1
- 帖子: 66
- 在线: 32.2小时
- 虫号: 1118986
- 注册: 2010-10-11
- 专业: 金属有机化学
★
ssyyll1019(金币+1):谢谢参与
ssyyll1019(金币+1):谢谢参与
|
1.不知TCEP还原剂的还原能力足够还原Au-S键吗？如果不够强，再过量也不会把Au-S键还原的。另，TCEP是磷酸三氯乙酯，酸性试剂，不知过量的TCEP是否会破坏DNA中的碱性嘌呤杂环。 2.参考一篇纳米金和晶状体蛋白作用的文献吧："Anti-glycation activity of gold nanoparticles", Nanomedicine:Nanotechnology, Biology, and Medicine, 2009, 5, 21-29. 文章中通过做光密度实验，检测蛋白的聚集程度。然后通过动态光散射测聚集体的直径。如果纳米金表面连上DNA链，那应该会产生一定的聚集，同时聚集程度的轻重可以通过测粒径来分析。另外，紫外可见吸收谱也有区别，因为如果有纳米金与DNA相连，分子中的芳香环的紫外吸收会产生变化的。但，我认为只做UV测试不能100%表明纳米金连上DNA了。UV的变化可能是因为Au-S键的形成，也可能是DNA与纳米金只是螯合而已，即并未形成化学键，只是电子间的相互吸引。 不好意思，对于生物我不太懂，只是从纯化学角度看这个问题。很想互相学习，因为我现在做蛋白的纳米修饰。  |
14楼2010-12-01 11:35:31
2楼2010-11-15 10:05:30
3楼2010-11-15 20:08:22
alxz
铁杆木虫 (职业作家)
其实我是一只大老鼠
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 5285.3
- 散金: 1431
- 红花: 15
- 沙发: 13
- 帖子: 4636
- 在线: 2152.5小时
- 虫号: 342190
- 注册: 2007-04-09
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
4楼2010-11-15 20:15:21
whutzhurong
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 6098.5
- 红花: 2
- 帖子: 636
- 在线: 199.1小时
- 虫号: 1108804
- 注册: 2010-09-27
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
5楼2010-11-15 20:49:15
ssyyll1019
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1034
- 散金: 79
- 红花: 5
- 帖子: 241
- 在线: 144.1小时
- 虫号: 818956
- 注册: 2009-07-30
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2010-11-18 11:14:09
8楼2010-11-18 11:23:30