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qiukq1989

至尊木虫 (正式写手)

[求助] 纳米金胶离心后加缓冲液聚沉，请问应该怎么解决？？？ 已有1人参与

用柠檬酸钠还原了氯金酸得到了10nm的纳米金，接着用氢氧化钠溶液调节pH=11，加入过量6-巯基己酸（乙醇溶），搅拌16个小时，然后离心，离心的转速为7000r/min，10℃，30min，将上清液全吸走，加入缓冲液（5mM Tris，50mM NaCl，pH=7.2），将沉淀分散后很快就变紫团聚了，问题出在了哪里呢？需要老化什么的吗？我是参考Colorimetric and luminescent bifunctional Ru(II) complex-modified gold nano probe for sensing of DNA这篇文献的，求解答！！！很快就要交本科毕业论文了，不解决这个问题没法做性质实验测试，就没有数据写论文。。。。。。。。求各路大侠帮忙救急！！！
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1楼 2012-04-21 00:00:16
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yunfei120

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiukq1989: 金币+2, ★有帮助 2012-04-21 21:12:52
问题出在加入了50mM的NaCl，我做纳米金这方面的，除了DNA修饰的纳米金能稳定存在0.05M以上的盐浓度外，其它很少能稳定，大多数会聚沉，可以先把盐浓度降低些分散，你试水分散肯定可以的。
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8楼2012-04-21 20:56:11
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桃子妖妖

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiukq1989: 金币+2, ★有帮助 2012-04-23 20:11:59
我们也是用柠檬酸钠还原的氯金酸，得到10nm左右的金的话，离心转速是14000r/min（eppendorf 5417R），20min左右，离心之后加入柠檬酸钠。加入乙醇，或者盐很容易变紫团聚。如果你确定你的实验没有问题(我是指你加的那些缓冲溶液之类的，因为我们还没有做和生物相关的)， 你可以试试改变一下离心转速和时间。我们有时候也会出现你说的情况，但是改变一下时间或者转速就好了！
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13楼2012-04-23 10:22:12
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普通回帖

zdy1398

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiukq1989: 金币+2, ★有帮助 2012-04-21 18:21:55
楼主都没有师兄师姐带的吗？你的缓冲液很可能有问题，你拿清水复溶试试，如果还是聚集，则离心时间降为10min，如果还是聚集，则就是前面的问题，你一步一步排除试试
最后一直排除到合成步骤
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2楼2012-04-21 08:39:16
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zihua886

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiukq1989: 金币+2, ★有帮助 2012-04-21 18:22:19
先按楼上说的用水试试看沉否，如果沉的话就是巯基乙酸修饰的问题 如果不沉就是缓冲溶液的问题  但是可以肯定的说不是离心转速的问题。具体的说，如果用水分散不沉的话 先考虑缓冲溶液的浓度，如果降低浓度都不行的话就换个缓冲体系；如果用水溶也沉的话，试试离心两次，还不行的话考虑是不是羧基的问题 能不能换成比羧基电离常数更大的基团
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工作原因，暂离数月。
3楼2012-04-21 10:13:48
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refnew

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qiukq1989: 金币+1 2012-04-21 18:22:26
缓冲溶液相当于加入了离子，不聚集就不正常了
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4楼2012-04-21 10:27:38
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qiukq1989

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zdy1398 at 2012-04-21 08:39:16:
楼主都没有师兄师姐带的吗？你的缓冲液很可能有问题，你拿清水复溶试试，如果还是聚集，则离心时间降为10min，如果还是聚集，则就是前面的问题，你一步一步排除试试
最后一直排除到合成步骤

用水可以复溶的，我实验室没做过纳米金，所以没人带
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5楼2012-04-21 18:05:28
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qiukq1989

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zihua886 at 2012-04-21 10:13:48:
先按楼上说的用水试试看沉否，如果沉的话就是巯基乙酸修饰的问题 如果不沉就是缓冲溶液的问题  但是可以肯定的说不是离心转速的问题。具体的说，如果用水分散不沉的话 先考虑缓冲溶液的浓度，如果降低浓度都不行的 ...

用水不会沉的。。。。我这个东西是准备拿来检测DNA的，对于缓冲液我一直很纠结，我试过没加NaCl的Tris缓冲溶液，这个可以恢复的很好，但是文献上有氯化钠的完全没问题，做生物实验缓冲液没有氯化钠液也说不过去，而且有人的NaCl浓度达到0.3mM的，所以一直没考虑换缓冲体系。
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6楼2012-04-21 18:19:42
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qiukq1989

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by refnew at 2012-04-21 10:27:38:
缓冲溶液相当于加入了离子，不聚集就不正常了

是啊，我也觉得啊，但是文献就在那里，我能说什么呢。。。。
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7楼2012-04-21 18:21:22
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qiukq1989

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by yunfei120 at 2012-04-21 20:56:11:
问题出在加入了50mM的NaCl，我做纳米金这方面的，除了DNA修饰的纳米金能稳定存在0.05M以上的盐浓度外，其它很少能稳定，大多数会聚沉，可以先把盐浓度降低些分散，你试水分散肯定可以的。

嗯，好的！谢谢哈，我明天试一下！
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9楼2012-04-21 21:12:33
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markar

版主 (知名作家)

光之电首席技术官

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qiukq1989: 金币+1, ★有帮助 2012-04-22 00:28:34
不离心的金纳米粒子你加入缓冲溶液的话都会聚沉的，更何况是离心后？
缓冲溶液中有离子，加入后改变了溶液中的粒子强度，必然会聚沉！
不过我目前用到的一种缓冲溶液是不会使金纳米粒子聚沉，就是硼酸硼砂缓冲溶液，不过不知道能不能调节到你要求的那个pH值！
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宠辱不惊，闲看庭前花开花落；去留无意，漫随天外云卷云舒！
10楼2012-04-21 21:30:15
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