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jerrity

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助PCR法构建三基因融合的实验技术

最近刚定了个题,先要做三个基因片段的融合,需要用PCR的方法,哪位高人给指点一下,或提供相关的资料,不胜感激!
  三个片段都是1000bp左右

[ Last edited by jerrity on 2010-10-16 at 12:03 ]
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

jerrity(金币+1): 2010-10-16 12:17:31
重叠PCR
2楼2010-10-16 12:08:13
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jerrity

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 虫子火箭兵 at 2010-10-16 12:08:13:
重叠PCR

我看了这个方法,但他做的片段很小 不知道我这个大片段行不
3楼2010-10-16 12:18:44
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by jerrity at 2010-10-16 12:18:44:

我看了这个方法,但他做的片段很小 不知道我这个大片段行不

1KB左右的应该问题不大
4楼2010-10-16 22:12:04
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)

jerrity(金币+1): 2010-10-19 08:32:01
都是一千可能会比较困难
我只是建议 你可以将三个均P上酶位点 然后分别跟你的质粒酶切结合 过程可能比较啰嗦  但是谁让你的都是一千多的呢
风中摇曳的颤枝,何处是归根?
5楼2010-10-18 00:59:48
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jerrity

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 魑魅-魍魉 at 2010-10-18 00:59:48:
都是一千可能会比较困难
我只是建议 你可以将三个均P上酶位点 然后分别跟你的质粒酶切结合 过程可能比较啰嗦  但是谁让你的都是一千多的呢

谢谢 你的建议,我决定用PCR试一试。
6楼2010-10-19 08:33:11
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