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maqifeng1985

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】农杆菌转化拟南芥问题

农杆菌转化拟南芥用哪个载体,pCAMBIA1301 还是pBI121?哪个转化效率高,两者有啥区别啊?

[ Last edited by maqifeng1985 on 2010-10-8 at 16:29 ]
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-10-09 08:34:23
maqifeng1985(金币+3):pCAMBIA1301有两个35s启动子,两个启动子之间有多个克隆位点,一个是启动潮霉素基因的,那另外一个35s是干啥用的啊?还有pBI121的35s后的克隆位点有5个克隆位点除你说的XbaI,BamHI, SmaI外还有xmal,mul.谢谢你的关注,祝福您! 2010-10-09 10:37:16
pBI121的35s后的克隆位点只有XbaI,BamHI, SmaI。pCAMBIA系列载体的克隆位点较多,但在promoter前面,promoter前面,所以使用这些克隆位点的时候要自己添加promoter和terminator。
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
3楼2010-10-09 07:27:24
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


silicare(金币+1):谢谢参与 2010-10-08 11:38:19
maqifeng1985(金币+1):谢谢你的回答,有篇文章把pBI121的终止区NOS克隆到pCAMBIA1301得EcolR1-Sacl位点上了,然后转到拟南芥上的,为啥不直接用pBI121这个载体啊,百思不得其解。 2010-10-08 16:34:10
转农杆菌这两个载体都可以。pBI121的克隆位点较少,pCAMBIA1301的克隆位点不太清楚,你查一下。在植物中的抗性可能都是Kanamicin吧,pCAMBIA1301是不是潮霉素呢?
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
2楼2010-10-08 11:32:01
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aga0110125

银虫 (小有名气)

maqifeng1985(金币+1):谢谢你的关注,留下脚印。 2010-10-10 10:28:56
和质粒、拟南芥品种、农杆菌菌株都有关系
4楼2010-10-09 13:02:14
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

maqifeng1985(金币+1):谢谢你的关注,留下脚印。 2010-10-10 10:30:02
pCAMBIa1301好像带GUS 基因吧,利于检测。PBI121在植物中的抗性是除草剂。
而且我个人认为植物转化效率的高低取决于载体与农杆菌菌株的相互配合,有些载体是不能与一些的农杆菌菌株共转化的。
5楼2010-10-09 20:09:44
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