应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR对照
111/2返回列表12下一页
查看: 1836  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

塞外雨

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR对照 已有8人参与


PCR对照，发现以水为对照时扔能出现目的条带，更换水（新买的dd水）、更换引物（粉末重新稀释），扔是这样，请帮我分析，是不是酶污染，到现在只有没有试过换酶了，但是同样的水、同样的酶P另外一个片度不会出现这样的问题。
请大家帮我分析一下，能证明我的转化子成功连接了目的基因吗？是不是对照不合格呢？
谢谢大家。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
1楼 2010-10-06 20:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我不明白你是怎么已水做对照的
是上样时直接加水吗？还是PCR无模板？还是PCR时什么也不加？
赞一下(1人) 回复此楼
从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
2楼2010-10-06 21:00:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

塞外雨

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by houjinglhy at 2010-10-06 21:00:29:
我不明白你是怎么已水做对照的
是上样时直接加水吗？还是PCR无模板？还是PCR时什么也不加？

即不加模板，以水替代，其余和其他管一样，即也加引物也加酶。
赞一下 回复此楼
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
3楼2010-10-06 21:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cato8163

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小可认为：是点样时，隔壁孔飘过来了。
建议点样时，隔的远点，来排除。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-10-06 21:09:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):好像很久不见了啊！ 2010-10-06 22:12:24
呵呵，P另外的片段的时候也许那对引物的特异性要比这对引物特异性强。

建议：

(1) 可以换酶，看你是微生物专业的，不知道P的是不是16S之类的，这个比较容易出现类似情况，毕竟每种细菌都有。

(2)考虑换人来做
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2010-10-06 21:10:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-10-06 22:12:30
可能是哪步出现交叉污染了吧 但是从亮度来看的话 差别还是很大 如果是做克隆筛选应该可以判断是阳性转化子吧
赞一下(2人) 回复此楼
从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
6楼2010-10-06 21:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

塞外雨

金虫 (著名写手)
谢谢以上各位的回答，今天换了管新酶再P一下。
赞一下 回复此楼
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
7楼2010-10-07 09:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foryever

木虫 (文坛精英)

假装忧伤的枯木桩
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我之前也遇到过这个问题。。。原因不明啊
赞一下(1人) 回复此楼
　　　　　　　　　♨物是人非事事休，欲语泪先流♨
8楼2010-10-07 10:22:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljq2007

银虫 (小有名气)
也可以不另外加水扩一下，总体感觉是飘过去的
赞一下 回复此楼
9楼2010-10-07 10:43:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋发-言午
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币-1):纯表的不允许 2010-10-08 11:59:46
10楼2010-10-07 13:28:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 塞外雨 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭