| 查看: 1989 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
superadeel新虫 (初入文坛)
|
[交流]
【求助/交流】土壤细菌多样性，引物F357GC R518 PCR老是出问题，求救！ 已有6人参与
|
||
|
做土壤细菌多样性时，提的DNA用F357-GC和R518跑PCR ，能扩出来，但是条带很宽，很模糊，后续DGGE切胶，也是P出来很模糊，测序测不出来。 请问哪位大侠做过，经验分享一下，不胜感激。按理来说这个应该很容易做出来，不知道到我这里出了什么问题。 25ul体系：mix 12.5ul, 引物（10UM）各0.5uL，水10.5ul,模板1uL。（用Takara Ex tap 酶体系也做过） 程序：用touchdown，94度6分钟，94度1分钟，65-55度45秒（一循环降0.5度），72度45秒，20循环。后15个循环是94度1分钟，55度45秒，72度45秒。最后延伸10分钟。 [ Last edited by superadeel on 2010-9-28 at 16:58 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有103人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
xiadongliang
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 973.3
- 散金: 1299
- 红花: 15
- 帖子: 759
- 在线: 361.7小时
- 虫号: 433819
- 注册: 2007-08-18
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
11楼2014-03-28 10:44:51
2楼2010-09-28 17:06:31
superadeel
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 89
- 散金: 11
- 红花: 1
- 帖子: 46
- 在线: 14.6小时
- 虫号: 1088404
- 注册: 2010-09-03
- 专业: 环境微生物学
3楼2010-09-28 20:20:43
xiadongliang
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 973.3
- 散金: 1299
- 红花: 15
- 帖子: 759
- 在线: 361.7小时
- 虫号: 433819
- 注册: 2007-08-18
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
4楼2010-09-29 11:10:30