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【求助】蛋白质测定 已有8人参与
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| 请问用缓冲溶液提取蛋白质的时候，标准曲线空白是用缓冲液呢，还是用蒸馏水，要是想将提取液稀释一定倍数是用蒸馏水稀释，还是用缓冲液？现在对于这个问题，我很纠结，自己觉得测定标准曲线时，蒸馏水都要用缓冲溶液替换掉了！！ |
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junwen6516
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蛋白质含量测定
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lovibond(金币+1):鼓励新虫发帖 2010-10-12 10:34:45
lovibond(金币+1):鼓励新虫发帖 2010-10-12 10:34:45
| 我用缓冲试剂加考马斯亮蓝测定了OD值，吸光度达到0.07，所以我觉得还是用缓冲溶液做标准曲线比较准确，可是现在的问题是用缓冲溶液（0.1mol柠檬酸-0.2mol磷酸氢二钠缓冲溶液）进行测定时，温度较低时有盐析出，我就用水溶液配制了牛血清蛋白，用缓冲试剂做空白计算提取率时可以达到70%多，但用水做再减去缓冲试剂吸光度，提取率只达到40%，这两种计算方法差别咋就这么大呢！再者计算不同缓冲溶液对蛋白质提取率时，都要分开做标准曲线（用缓冲试剂做空白，标准曲线中水用缓冲试剂替代），这样是不是具有可比性呢？不明白，自己对这个问题很迷糊！！请大家帮我想想办法！！！ |
9楼2010-10-11 23:46:15