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davidck

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】有做过细菌的β-半乳糖苷酶酶活力测试的战友吧?帮忙看下

有做过细菌的β-半乳糖苷酶酶活力测试的战友吧?打算做做这个实验
想找个试剂盒做,能不能推荐几个比价经济实惠的啊,谢啦

还有,看文献上有的单位是U/OD600,但是protocol上都是用OD420检测,这是咋回事?有冲突么?

谢谢指教
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铯铯

木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-09-21 06:12:49
davidck(金币+5):能发个protocol给我参考下么?好像大部分都是细胞的,关于细菌的很少,尤其是前处理,谢啦 2010-09-25 20:01:13
我们当时用的不是试剂盒,是用ONPG当底物,用的是OD480,是参考一个文献上的,如果楼主用试剂盒的话,就按照试剂盒的说明测,还有,就是建议把样品多稀释几个梯度,因为这个反应很灵敏,如果有酶活的话,一下子说变色就变色了,终止反应的时候加的是碳酸钠,如果几个样品活性差不多的话,基本上差别不大,如果是定性的话,可能还好,还有,不管用OD多少,都要用比较精密的分光光度计,这样才能保障实验数据的准确性
2楼2010-09-20 21:42:16
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sfxt001

木虫 (小有名气)

davidck(金币+5):能具体说说么?那个600是来说明菌的数量的?这两个数值怎么用啊? 2010-09-25 20:00:22
OD420和OD600是都要测的,420测的是你的底物显色的深浅,而600是你测试前取菌的菌浓度。
3楼2010-09-20 21:46:18
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