24小时热门版块排行榜    

查看: 1492  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋

[交流] 【求助/交流】大片段pcr问题 已有4人参与

请教有p过大片段的高手,我p的片段有5kb,p了很多次了,都没看到目的条带。甚至连引物二聚体都看不到?求高手指导????
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

第三军团
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
La-Taq应该可以。
Thank-you,so-blue.
8楼2010-09-25 09:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

sfxt001

木虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-09-21 06:09:17
5K不算很大的片段吧?造成你说的情况的原因很多,比如引物设计的有问题,你用的酶扩增能力不好,PCR的条件没有优化,模板质量不好等等。
2楼2010-09-20 21:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋

引用回帖:
Originally posted by sfxt001 at 2010-09-20 21:58:37:
5K不算很大的片段吧?造成你说的情况的原因很多,比如引物设计的有问题,你用的酶扩增能力不好,PCR的条件没有优化,模板质量不好等等。

引物已经设计过两对了,模板是质粒也重新提取了应该不是这两个问题,想问下你用的什么酶呢?我用的pyrobest。
第三军团
3楼2010-09-21 09:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfxt001

木虫 (小有名气)

xutao(金币+10): 2010-09-21 12:05:57
引用回帖:
Originally posted by xutao at 2010-09-21 09:57:35:

引物已经设计过两对了,模板是质粒也重新提取了应该不是这两个问题,想问下你用的什么酶呢?我用的pyrobest。

我扩10几K的片段是用的是Primstar
4楼2010-09-21 10:09:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见