24小时热门版块排行榜    

查看: 1384  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mango70803575

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】在SDS-PAGE当中遇到的一些问题

我做的是从真菌发酵液中筛选活性蛋白,选用SPFF柱,现已分离出几个峰,将收集的峰富集蛋白做SDS-PAGE时,因为考染有几个泳道看不清条带,于是进行银染,但银染的结果发现,除了原先考染可见的条带之外,几乎每个泳道在相同的位置都有杂带
我想问的是,所有泳道相同位置都存在的杂带,是不是因为我的分离不够彻底,还是可能存在富集过程中使用溶液的问题,或还有其他原因?
希望高手指点!
回复此楼
过去的一切等于零,现在的一切从零开始!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


mango70803575(金币+1): 2010-09-26 08:47:39
冰醋酸多加点~
9楼2010-09-25 12:00:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

sqhnsd

金虫 (正式写手)

mango70803575(金币+1): 2010-09-20 08:15:26
引用回帖:
Originally posted by mango70803575 at 2010-09-17 09:52:37:
我做的是从真菌发酵液中筛选活性蛋白,选用SPFF柱,现已分离出几个峰,将收集的峰富集蛋白做SDS-PAGE时,因为考染有几个泳道看不清条带,于是进行银染,但银染的结果发现,除了原先考染可见的条带之外,几乎每个泳 ...

我没有用过你说的SPFF柱,不过单纯凭一个离子交换柱就想得到比较纯的蛋白,可能性不大吧。
2楼2010-09-17 17:08:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mango70803575

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-09-17 17:08:18:

我没有用过你说的SPFF柱,不过单纯凭一个离子交换柱就想得到比较纯的蛋白,可能性不大吧。

这个可能性确实不大,但我是想看看活性峰里的蛋白大概在多少分子量
过去的一切等于零,现在的一切从零开始!
3楼2010-09-20 08:15:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)

mango70803575(金币+1): 2010-09-25 10:40:30
引用回帖:
Originally posted by mango70803575 at 2010-09-20 08:15:10:

这个可能性确实不大,但我是想看看活性峰里的蛋白大概在多少分子量

很困难,你没有抗体。而且,活性峰的最浓蛋白,不见得是你的目的蛋白
4楼2010-09-20 08:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Qj98d49dHFb9 2026-08-25 4/200 2026-08-26 03:08 by cNXvBfCpiZOM
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 7K1CJE38xLG4 2026-08-25 4/200 2026-08-26 02:04 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +17 木水思豆 2026-08-25 20/1000 2026-08-26 01:26 by chengyan1220
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见