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qingbingx

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE 制胶时为什么胶面出现弯曲不平 已有38人参与


如上图所示,分离胶凝固后,把水层倒掉,发现胶面不是以前那种很直的一条水平线,而是弯弯曲曲的,而且分离胶的底部有一小段老是凝不上,从制胶架上取下后底部那段直接流下来,就是液体,所有的储备液都重新配了,APS也是现配的,也混匀了,可还是老样子,都重复N多次了,也不知道是什么原因,一样的操作,想想以前也没有遇到过这种问题,只犯晕,大家有碰到这种现象啊?
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yanlili

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
取下胶条时,底部有水是很正常的,没什么大问题。个人认为,加进去的分离胶有时候聚丙烯酰胺不可能把所有的水都包在其网格内,下面的液体你再等它也不会凝,挥发倒是有可能。
从胶的情况看,还是因为不均匀或凝结太快导致的。lz可以先混匀后再迅速的加入APS和TEMED,再混匀。把TEMED的量减少一点。
封胶用正丁醇的效果也很好,比水要好,另外,用琼脂糖封下胶板,防止漏液。
25楼2010-09-20 14:11:46
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