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zhouheyi_2

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNA酶切回收跑胶怎么有小条带啊?[ 已有2人参与

DNA酶切回收跑胶怎么有小条带啊?
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yaya
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阿娇

金虫 (正式写手)

★
zhouheyi_2(金币+1):谢谢参与
是质粒酶切还是基因组酶切??
2楼2010-09-02 16:47:23
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周_yan

木虫 (小有名气)

★
zhouheyi_2(金币+1):谢谢参与
哪一个是你回收跑的带啊?都是吗?
3楼2010-09-02 17:33:14
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zhixuec

木虫 (著名写手)

★ ★
zhouheyi_2(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1):鼓励交流! 2010-09-02 20:44:21
从marker可以看出你的电泳没有跑好 不是其他问题

你先重新制一板胶跑一下看看  控制好电压和电流

祝你实验顺利~!
酷爱の族
4楼2010-09-02 19:34:43
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★
zhouheyi_2(金币+1):谢谢参与
莫非犯了个低级错误,酶切位点在你的DNA片段中也存在?
Thank-you,so-blue.
5楼2010-09-03 10:14:52
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dingnan8822

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
zhouheyi_2(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):有这种可能~ 2010-09-03 10:45:49
上图不说明,谁也不好说啊~
这么多泳道,哪个是呢?
如果都是的话,每个泳道都有那个小带,那么可能是你回收体系的问题,是不是试剂污染了?
6楼2010-09-03 10:20:03
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molecula

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+2):谢谢参与 2010-09-03 13:32:54
我觉得你没有阐述问题出现的前因 所以 我们没法分析问题出在哪里

首先  如果你要做检测 做胶  可以直接做小孔的胶  点上三四微升的样品
跑一下看看就好  但是你的这个割胶回收的验证胶上有许多杂带
这个 不知道你切得什么 所以无法下结论
再次 你这个图片实在不专心  你看看大家发的文章  
首先  图片要先用QQone做一下  也就是调一调色度调一调角度
调完之后 你要矫正图片  也就是说 Marker按照正常的期刊要求
应该是在左边  同时 你使用的Marker没必要用个几万单位的
直接用DL2000就足够了  因为你要的是目的条带 不是质粒啊

另外 拍照之前  请清理干净扫胶的托盘 不要看起来图片很脏的样子。。。



[ Last edited by molecula on 2010-9-3 at 11:15 ]
7楼2010-09-03 11:14:28
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molecula

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):很热心,欢迎常来~~ 2010-09-03 15:21:46
上边这个图片 就是酶切验证的电泳图片
酶切体系是10ul  点样是5ul
Marker 是DL2000(TakaRa)
酶的用量根据酶切底物量计算
8楼2010-09-03 11:17:15
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zhouheyi_2

铁虫 (小有名气)

这块胶上所有的都是PCR回收产物,是回收完了后进行检测用的,上样量6微升,maker中最亮的一条是1kb.在割胶回收的时候,原本胶上没有小片段的弥散。
yaya
9楼2010-09-03 14:34:28
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