| 查看: 3313 | 回复: 19 | |||
chinaluhy银虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】western blot中的怪现象，求解~~~ 已有4人参与
|
|
事情是这样的，我是新手，学习做western blot有一个多月的时间。出现了一件怪事情，我们胶上的蛋白怎么也转不到膜上~~~实验室这么多年从来没有出现过的怪事~郁闷啊！ 具体情况如下： 我们使用的是5%的浓缩胶，12的分离胶，湿法转膜。 15号上午我配了三块胶，16号上午另外一个同学配了一块胶，16号下午上样，16号晚上转膜过夜，恒流200mA，使用NC膜。17号上午拆掉转膜装置，丽春红预染时发现marker还在胶上，膜上几乎什么都没有。重新配置转膜液，17号晚上恒压30V转膜过夜，18号上午还是没有转上去。18号换了转膜液中的试剂，Tris，甘氨酸，甲醇，200mA转膜2小时，下午发现还是没有转上~~~我们又重新配制了两块胶，上样电泳后，将一块新胶和一块旧胶放在同一个转膜的盒子里，今天起来，新胶转上了，旧胶还是没转上~~~用考马斯亮蓝染旧胶，发现蛋白泳道都在胶上。 现在实验室的人都没有办法解释这个现象，希望有经验的人可以来指明方向。谢谢！ 忘说了，实验还有师兄师姐在做，结果都很好。老师还让我们试了一下pvdf膜，还是转不上去。谢谢大家踊跃解答疑问~ [ Last edited by chinaluhy on 2010-8-19 at 18:31 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有66人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Western Blot 显影时PGDF膜上全是荧光，求解，有没有懂的呀
已经有15人回复
- 求助，Western-Blot转膜不成功
已经有22人回复
- western blot中蛋白质转印问题
已经有17人回复
- 提供Western blot技术服务
已经有63人回复
- Western blot中出现的问题-求高手指点
已经有17人回复
- 新手求助western blot
已经有22人回复
- 【求助/交流】westernblot
已经有10人回复
- 【分享】新手上路 Western blot问题集合
已经有6人回复
- 【求助/交流】western blot
已经有35人回复
- 【求助/交流】请教Western blot出现非特异性条带的怎么解决
已经有8人回复
- 【求助/交流】western blot中，蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗，怎么还能和一抗结合？
已经有13人回复
- 【求助/交流】western blot抗体稀释液中叠氮钠的含量
已经有5人回复
- 原创首发：Tips for Western Blot-一些小技巧而已
已经有13人回复
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- MolEPI: 1
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
2楼2010-08-19 17:34:49
3楼2010-08-19 17:40:03
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
难道拿错膜拿成PVDF膜了？4楼2010-08-19 17:54:26
chinaluhy
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 282.6
- 散金: 237
- 帖子: 954
- 在线: 32.7小时
- 虫号: 695212
- 注册: 2009-02-02
- 专业: 细胞信号转导
5楼2010-08-19 18:33:04
chinaluhy
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 282.6
- 散金: 237
- 帖子: 954
- 在线: 32.7小时
- 虫号: 695212
- 注册: 2009-02-02
- 专业: 细胞信号转导
6楼2010-08-19 18:34:37
chinaluhy
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 282.6
- 散金: 237
- 帖子: 954
- 在线: 32.7小时
- 虫号: 695212
- 注册: 2009-02-02
- 专业: 细胞信号转导
7楼2010-08-19 18:35:10
zhandeguo1
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 369.8
- 散金: 14
- 帖子: 128
- 在线: 20.8小时
- 虫号: 1065590
- 注册: 2010-07-28
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
8楼2010-08-19 21:40:18
dhd997
荣誉版主 (文坛精英)
自由人，我型我秀！
- MolEPI: 5
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 4.021
- 金币: 22094.4
- 散金: 1968
- 红花: 45
- 沙发: 161
- 帖子: 22410
- 在线: 927.9小时
- 虫号: 500412
- 注册: 2008-02-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
- 管辖: 分子生物
9楼2010-08-19 22:15:49
10楼2010-08-19 22:27:21
