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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】HPLC出峰问题~
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pang0807

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】HPLC出峰问题~ 已有11人参与

各们虫友~~我前些天在紫外上测了我待测样品的最大吸收峰，今天用测出来的最大吸收峰上液相，就前两三分钟出几个峰，后面的几乎没有峰或是只有一两个小小的峰，前两三分钟是不是溶剂峰呀？？
而且峰的分离效果也不好，没怎么分开，请教各位高手帮忙分析分析~~有什么办法能让峰分离得好一点吗？？？十分感谢~~~
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长乐未央
1楼 2010-08-19 14:50:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

novus

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
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karl2100(金币+1):谢谢回帖！ 2010-08-21 20:35:50
楼主问问题是最好把自己的遇到的麻烦事情写详细点哦，要不然回帖时我们也比较茫然。

1. 请问楼主所说的最大吸收峰紫外波长是多少？
2. 请问前两三分钟出了几个峰？是什么样子的峰？
3. 请问样品溶剂是什么？
4. 请问你使用的方法是什么样的？流动相，色谱柱，梯度？
赞一下(3人) 回复此楼
别太放肆，没什么用！
2楼2010-08-19 17:00:14
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普通回帖

pang0807

新虫 (初入文坛)
不好意思~~~打错了，是最大吸收波长~~
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长乐未央
3楼2010-08-19 17:23:25
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drugmen

金虫 (正式写手)
★
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“我前些天在紫外上测了我待测样品的最大吸收峰，今天用测出来的最大吸收峰上液相，”这个应该是说测出个最大吸收波长吧？然后根据检测出的波长上液相。
一般来说，最初的0——3分钟内可以认为是溶剂峰。但还要看样品情况，流动相的选择而定。若是是样品在所选择流动相洗脱很强，很有可能就在2、3分钟内出峰了。
峰分离不好，可先调整流动相比例看看。
最好LZ能把图片贴上来，让大家看看。
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本人顶贴从不吝啬，楼主要多发好贴；反正又不是扣我金币。
4楼2010-08-19 17:25:11
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zw80780221
karl2100:请勿回复纯表情贴，谢谢！ 2010-08-21 20:35:21
5楼2010-08-19 17:28:48
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dayao

银虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100(金币+1):谢谢参与讨论！ 2010-08-21 20:35:39
前3分钟很多情况下是溶剂峰的
如果是你样品中的峰，那么后面的小峰只能这样解释了：此波长不是出峰物质的最大吸收波长------不知道我理解的对不对
赞一下(2人) 回复此楼
无与伦比的美丽
6楼2010-08-19 18:15:38
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lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)
★
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运行时间不够？
没有平衡好？
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7楼2010-08-20 07:58:22
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pavay998

金虫 (小有名气)
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karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-08-21 20:36:05
最好用含量测定的对照品（纯品）配溶液做紫外吸收扫描，得出最大吸收峰。
赞一下(2人) 回复此楼
天若有情天亦老
8楼2010-08-20 09:22:58
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zuowensong

新虫 (初入文坛)
将有机相的比例调低一些，看看出峰时间会不会延长啊，可能是一下子都出来了吧
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9楼2010-08-21 14:14:03
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xtwar

金虫 (正式写手)
★
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我也遇到过这问题，
上届的解释是 最好用dad检测器测最大吸收波长
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10楼2010-08-21 22:55:32
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