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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】求助:PXO99感受态的制备和电转化

PXO99是水稻白叶枯病菌的一个小种,革兰氏阴性菌。
   感受态的制备过程:用预冷的10%甘油洗涤四次,每次大约25ml,分装,-80度保藏。
   电转化过程:加1微升质粒到50微升感受态细胞中,轻轻混匀,冰预30min,用eppendorf  electroporator2510 型电转化仪和0.1cm eppendorf 的预冷电转化杯,1800v进行电击转化,接着用SOC进行恢复6h,涂板。
    可为什么一点都长不出来?
    请教各位大侠帮帮忙,不胜感激!
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我选择,我喜欢;我喜欢我的选择。
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

恢复时间长有影响吗?我做过存活率实验,感受态也应该没问题,也做过电压梯度,但一直没有结果,想问一下又没有可能是质粒的关系?
我选择,我喜欢;我喜欢我的选择。
3楼2010-09-17 10:48:49
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

正在努力中
我选择,我喜欢;我喜欢我的选择。
6楼2010-10-01 14:35:00
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