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dabizi_911金虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】原代细胞的分离与纯化培养
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| 咱们原代细胞从动物体中分离，有没有什么技巧呢，分离后纯化单一的细胞有什么好的技巧没，希望大伙多多说一下自己的观点，我以后也是做细胞的。谢谢 |
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2楼2010-08-18 02:43:33
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dabizi_911(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+3):鼓励交流，欢迎常来~~ 2010-08-22 09:10:41
dabizi_911(金币+1):谢谢参与
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1、预先高压消毒所需要的器材 2、取完新鲜组织后要用冰冷充分洗涤洗掉杂细胞，分离也要尽量挑除血管等。不过也不要搞太久，否则分出来的细胞活力很差 3、胶原酶比胰酶更适合消化组织，消化时间和强度就要自己摸索 4、建议在胶原酶快消化结束之前加DNase I，这样细胞会更加分散，过筛子的时候更好过，分出来的细胞量更大 5、种板两天之内不要去碰他，加1.5~2倍双抗养着。两天后第一次换液的时候小心点，慢慢摇晃摇掉杂细胞。后续的换液也同样操作，视情况可以冲洗， |
6楼2010-08-18 09:31:39
dabizi_911
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9楼2010-08-21 00:44:03
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