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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】原代细胞的分离与纯化培养
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mafang68

金虫 (著名写手)
dabizi_911(金币+1): 2010-08-22 08:10:01
引用回帖:
Originally posted by dabizi_911 at 2010-08-21 00:44:03:

我需要的分离肠上皮细胞，你能把你的上皮淋巴细胞的分离方法交流一下吗，或者有什么好的参考书你那有的话，可以发一份给我吗？
chenhq@ihep.ac.cn
谢谢

好的
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木虫啦，哈哈
11楼2010-08-21 22:36:11
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angie8610

铁虫 (小有名气)
★
dabizi_911(金币+1):谢谢参与
有做过皮肤黑素细胞的实验的没？
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新手上路，多多关照！
12楼2012-03-04 09:20:38
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chiscien

铁虫 (初入文坛)
★
dabizi_911(金币+1): 谢谢参与
原代细胞纯化的方法，看什么方法适合你，希望对你有所帮助：
（1）酶消化法
在消化培养细胞时，常是成纤维细胞先脱壁，而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁，特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显，因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
（2）机械划除法
原代培养成功后，上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现，混杂生长。这种混杂生长常常分区成片，每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
（3）反复贴壁法
成纤维细胞与上皮细胞相比，其贴壁过程快，大部分细胞常能在短时间内大约10－30min完成附着过程，而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定，稍加振荡即浮起，这样可以利用此差别来纯化细胞。
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13楼2012-05-11 13:36:18
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fishyr

金虫 (正式写手)
★
dabizi_911(金币+1): 谢谢参与
有人做过人胃黏膜上皮细胞GES-1原代培养没？请问原始组织是找医院要的吗？
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14楼2012-07-31 14:55:43
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完美紫蝶

新虫 (初入文坛)
★
dabizi_911(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
1480334楼: Originally posted by dabizi_911 at 2010-08-18 19:59:57
有人做过肠上皮细胞的原代细胞的分离与纯化没

我现在在培养肠上皮原代细胞，关于一些添加因子的问题想请教您，购买胰岛素的时候，他建议我添加2 至 20 μg/ml，要是我加10ml培养基，我就得家10ml的2 至 20 μg/ml的胰岛素吗？？
谢谢您了
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15楼2013-04-01 11:09:52
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噶的

铜虫 (初入文坛)
★
dabizi_911(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
8楼: Originally posted by mafang68 at 2010-08-20 22:41:44
我做过小鼠的上皮淋巴细胞的分离

能不能也发我一份资料，谢谢
gwxing07@163.com
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16楼2015-12-02 19:32:11
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爱情曼陀罗

新虫 (著名写手)
★
dabizi_911(金币+1): 谢谢参与
我就是做原代细胞培养的

发自小木虫Android客户端
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17楼2015-12-03 00:07:04
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彩色的斑马
★
dabizi_911(金币+1): 谢谢参与
。

发自小木虫Android客户端
18楼2015-12-03 00:14:09
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