24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2525  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dabizi_911

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】原代细胞的分离与纯化培养

咱们原代细胞从动物体中分离,有没有什么技巧呢,分离后纯化单一的细胞有什么好的技巧没,希望大伙多多说一下自己的观点,我以后也是做细胞的。谢谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dabizi_911

金虫 (著名写手)

能提供些支持吗

引用回帖:
Originally posted by mafang68 at 2010-08-20 22:41:44:



我做过小鼠的上皮淋巴细胞的分离

我需要的分离肠上皮细胞,你能把你的上皮淋巴细胞的分离方法交流一下吗,或者有什么好的参考书你那有的话,可以发一份给我吗?
chenhq@ihep.ac.cn
谢谢
9楼2010-08-21 00:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

sandra2128

金虫 (小有名气)

★ ★
dabizi_911(金币+1):谢谢参与
看天(金币+1):鼓励一下 2010-08-20 22:53:32
1、无菌操作很重要。我平时是去下载组织后用75%酒精浸泡2-3min,然后用生理盐水洗15遍以上。
2、工具很重要。俗话说磨刀不误砍柴工,有好的工具在手,剥离或者切割就不会浪费很长时间,保证了整个分离过程的时长不会对细胞活性造成影响。
3、media很重要。事先把media准备好,分离出来后及时加上media,保证细胞活性。记得加pen/strep。原代时可适量加倍。
4、按时换液。原代及时换液可以防止污染。
暂时就能总结这么多了。以后想起来再补充吧
静而后能安;安而后能思;思而后能得。
2楼2010-08-18 02:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mafang68

金虫 (著名写手)

★ ★ ★
dabizi_911(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2):新虫,鼓励交流~~ 2010-08-22 09:09:58
1 提取时速度要快,提前把材料准备好,想周全,做实验时拿来就用,不要现找
2 保证无菌,分离时可加双抗;PBS里还可以加上血清,保证细胞状态好
3 分离后的细胞要纯化,可通过不同群的细胞是否贴壁等简单纯化;要想纯度高,可用磁珠分选,不过价格高
4 一些细胞要保持活性需在培养时加入细胞因子。我分离的淋巴细胞就需要IL-2;树突状细胞则需加GM-CSF和IL-4
知道的就这么些了
木虫啦,哈哈
3楼2010-08-18 08:51:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夜龙舞

金虫 (小有名气)


dabizi_911(金币+1):谢谢参与
原代细胞培养是组织消化后细胞量非常巨大,一般要计数后再放进方瓶内培养,但是都嫌麻烦不怎么做,这是要取舍,舍弃一定量的单细胞悬液,而且原代细胞要传几代稳定了再做实验。只要严格细胞操作技术规范,一般没有问题。
4楼2010-08-18 09:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 294求调剂 +7 淡然654321 2026-04-17 8/400 2026-04-17 16:36 by wutongshun
[考研] 271求调剂 +37 2261744733 2026-04-11 39/1950 2026-04-17 10:11 by 黑科技矿业
[考研] 297,工科调剂? +4 河南农业大学-能 2026-04-14 4/200 2026-04-16 22:52 by wulijun2012
[考研] 291求调剂 +9 关忆北. 2026-04-14 9/450 2026-04-16 22:49 by cfdbai
[考研] 求调剂 +8 小聂爱学习 2026-04-16 10/500 2026-04-16 22:06 by 1shin_ichi
[考研] 22408 312求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-14 25/1250 2026-04-16 21:21 by Art1977
[考研] 322求调剂 +8 123安康 2026-04-12 15/750 2026-04-16 11:07 by Espannnnnol
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 366求调剂 +11 不知名的小卅 2026-04-11 11/550 2026-04-14 15:50 by zs92450
[考研] 农学0904 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-11 4/200 2026-04-14 09:10 by zs92450
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿浙大生物325分求调剂 +9 zysheng 2026-04-12 9/450 2026-04-12 22:31 by yuyin1233
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
信息提示
请填处理意见