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沐七七

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】帮忙看下RNA电泳图,谢谢大家啦 已有9人参与

图片没有处理,请大家帮忙看看,第二个和第三个泳道中提取的RNA能否直接用于反转录,需要做消化吗?第四和第五个泳道为什么会是这样??是因为多糖含量高吗??因为我吸取的时候发现有粘连,所以考虑是多糖,因为是新手,请大家不吝赐教,谢谢啦





[ Last edited by 沐七七 on 2010-8-16 at 11:29 ]
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-17 05:58:16
你marker的最大条带是多大?
最上面那条带是gDNA吧,很明显了,得消化
2楼2010-08-16 11:53:01
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wang7x7x

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-17 05:58:25
你跑的是TAE电泳吧,建议你跑下MOPS电泳。再者你这DNA污染很明显,需要消化DNA。
生活
3楼2010-08-16 16:35:56
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-17 05:58:40
有降解,不过不严重,可以RT,
不过基因组太多了,消化吧
不消化的话就需要夸内含子了
4楼2010-08-16 17:50:07
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夜龙舞

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
前两个泳道的5s,16s,23srRNA很清晰,可以反转了,后两个是不是污染了,被分解了。
5楼2010-08-16 17:57:47
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-17 05:58:55
普通电泳跑了这么远,RNA还能这样已经不错了,后两个看起来是不如前两个,但是感觉也能用,试试吧
6楼2010-08-16 22:13:48
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沐七七

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-08-16 11:53:01:
你marker的最大条带是多大?
最上面那条带是gDNA吧,很明显了,得消化

marker最大是10000bp的,谢谢您的回复,
7楼2010-08-17 17:32:51
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沐七七

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wang7x7x at 2010-08-16 16:35:56:
你跑的是TAE电泳吧,建议你跑下MOPS电泳。再者你这DNA污染很明显,需要消化DNA。

是呀,跑的是TAE,回头我试下,我想问一下,提出来的RNA放-80保存的,如果再进行消化反转录,效果还好吗??谢谢您的回复
8楼2010-08-17 17:35:10
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沐七七

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wang7x7x at 2010-08-16 16:35:56:
你跑的是TAE电泳吧,建议你跑下MOPS电泳。再者你这DNA污染很明显,需要消化DNA。

嗯啊,知道了,谢谢您的帮忙
9楼2010-08-17 17:36:08
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沐七七

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-08-16 17:50:07:
有降解,不过不严重,可以RT,
不过基因组太多了,消化吧
不消化的话就需要夸内含子了

嗯,我试试,呵呵,谢谢您的帮忙,
10楼2010-08-17 17:37:24
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