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snowgirl1065

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】高效液相梯度洗脱基线问题 已有3人参与

最近在做一个头孢品种,美国药典及中国药典均用的梯度洗脱程序,
流动相A:0.1%四甲基氢氧化铵溶液(磷酸调pH值5.5),1000ml中加入0.1mol/mlEDTA-2Na2ml
流动相B:0.1%四甲基氢氧化铵溶液(磷酸调pH值5.5)-乙腈-甲醇(500:300:200)
甲醇,乙腈均是用的进口的

现在走空白梯度就是有较大的峰,请熟悉梯度的朋友分析下原因,还有四甲基氢氧化铵与EDTA-2Na之间有无作用?
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hy89pj

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
何谓空白梯我见过但也不知道咋回事
7楼2010-08-17 16:47:32
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音


snowgirl1065(金币+2):谢谢参与
snowgirl1065(金币+2): 2010-08-13 13:26:02
走空白梯度就是有较大的峰,是不是指不进样品走基线时基线不稳,有较大起伏,这个在梯度洗脱中很常见,要多平衡一段时间,而且和波长有关,波长越大基线越稳
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-08-13 13:17:16
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)


snowgirl1065(金币+2):谢谢参与
据俺了解,跟用的水的质量有关
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
3楼2010-08-13 13:28:40
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bully518

金虫 (小有名气)


snowgirl1065(金币+2):谢谢参与
首先要走空白,看空白是否也有较大出峰,尽量平衡时间长一点
然后看你的洗脱曲线,加入过去陡,基本很难平,建议梯度缓一些
我也不知道两者有无反应,不过EDTA-2Na只是金属离子螯合剂,应该和它没有反应的,个人假象啊!
4楼2010-08-13 15:08:10
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