应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于DNA提取的问题。请高手赐教
51/1返回列表
查看: 2012  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ffrc

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于DNA提取的问题。请高手赐教 已有9人参与

请高手赐教以下问题。
我提DNA过程中，先后用裂解液、饱和酚、酚仿醇（25:24:1）、氯仿、酒精、75%酒精。最后用TE溶解。
此过程没有用RNase。
这个过程提取下来的DNA有RNA干扰，有蛋白残留。
请问如何将这个粗提的DNA纯化。
在哪里加RNase,加多少，如何一步步纯化。
请细告知。谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-04 21:45:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nql_sdau

银虫 (小有名气)
★
ffrc(金币+1):谢谢参与
我当时提取的是昆虫的！动物蛋白特别的多，我加了蛋白酶K降解蛋白。你试试看！
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-08-05 08:44:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

louli

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
ffrc(金币+1):谢谢参与
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-05 06:05:32
引用回帖:
Originally posted by ffrc at 2010-08-04 21:45:11:
请高手赐教以下问题。
我提DNA过程中，先后用裂解液、饱和酚、酚仿醇（25:24:1）、氯仿、酒精、75%酒精。最后用TE溶解。
此过程没有用RNase。
这个过程提取下来的DNA有RNA干扰，有蛋白残留。
请问如何将这个粗 ...

加完裂解液之后，水浴65°一个小时，降至室温，加入5微升的RNAse，如果蛋白含量高，加饱和酚抽提，然后加入等体积的氯仿异戊醇（24：1），离心，取上清，加十分之一体积的乙酸钠和等体积的异丙醇，离心10min。用76%的乙醇离心5min洗涤，再用70%的乙醇洗涤，晾干，一般用水溶解。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-04 22:25:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hustxiong

木虫 (正式写手)
★
ffrc(金币+1):谢谢参与
要看看 你用的是什么裂解液了，CTAB,SDS 等都是PCR抑制剂，彻底清除需要相应试剂的剂量把握，比如用醋酸钾除SDS。
建议  购买DNA纯化试剂盒，这样后续试验会顺利很多，国产的 一般不会太贵，效果都还不错。原理就是通过硅胶柱吸附后， 再洗脱。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-08-04 22:38:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

accident1256

铜虫 (小有名气)
★
ffrc(金币+1):谢谢参与
看试剂盒的说明书~~
赞一下(1人) 回复此楼
人各有命~
4楼2010-08-04 22:45:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +5 大火山小火山 2026-03-16 7/350 2026-03-17 10:26 by peike
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +3 张vvvv 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:25 by 张vvvv
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 材料与化工求调剂 +3 为学666 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:09 by 加号+
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀！ 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭