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ffrc

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 336.7
散金: 382
帖子: 282
在线: 204小时
虫号: 595800
注册: 2008-09-08
专业: 环境污染化学

[交流] 【求助/交流】关于DNA提取的问题。请高手赐教已有9人参与

请高手赐教以下问题。
我提DNA过程中，先后用裂解液、饱和酚、酚仿醇（25:24:1）、氯仿、酒精、75%酒精。最后用TE溶解。
此过程没有用RNase。
这个过程提取下来的DNA有RNA干扰，有蛋白残留。
请问如何将这个粗提的DNA纯化。
在哪里加RNase,加多少，如何一步步纯化。
请细告知。谢谢

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1楼2010-08-04 21:45:11

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hustxiong

木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4103.9
散金: 120
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在线: 99.5小时
虫号: 62816
注册: 2005-04-02
性别: GG
专业: 环境微生物学

★
ffrc(金币+1):谢谢参与

要看看你用的是什么裂解液了，CTAB,SDS 等都是PCR抑制剂，彻底清除需要相应试剂的剂量把握，比如用醋酸钾除SDS。
建议购买DNA纯化试剂盒，这样后续试验会顺利很多，国产的一般不会太贵，效果都还不错。原理就是通过硅胶柱吸附后，再洗脱。

赞一下(1人)

3楼2010-08-04 22:38:43

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