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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于转化凃板的问题
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senoy

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于转化凃板的问题 已有3人参与

昨天做了一个电击转化，空白不带抗性LB活化一小时后，用原液、原液浓缩十倍的菌液凃板，结果原液长出的单克隆奇多。而浓缩的原液几乎看不到单克隆。
氨苄抗性平板为同一批次制备的，凃板时涂布器的温度也没有问题。请问上面现象的原因可能是什么？

[ Last edited by senoy on 2010-7-8 at 21:58 ]
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1楼 2010-07-08 21:54:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
看天(金币+1):for your en. 2010-07-08 22:50:28
senoy(金币+2):谢谢，可能是菌太多了。呵呵。 2010-07-08 22:53:44
看不到单克隆是什么状态，是不是整个板子表面都模糊了，像磨砂平面一样，如果是，就是浓度太大，长满了。如果LB板还是和原来一样光滑，那说明没长菌，恐怕是浓缩的步骤出问题了。
我感觉你这个浓度大了，少涂点，或者干脆划板
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2楼2010-07-08 22:13:23
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senoy

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-07-08 22:13:23:
看不到单克隆是什么状态，是不是整个板子表面都模糊了，像磨砂平面一样，如果是，就是浓度太大，长满了。如果LB板还是和原来一样光滑，那说明没长菌，恐怕是浓缩的步骤出问题了。
我感觉你这个浓度大了，少涂点， ...

原液凃板后像磨砂平面，
浓缩过的原液凃板长的和原来一样光滑。浓缩过程是6000rpm,6min,应该是没问题的。
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3楼2010-07-08 22:36:31
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
senoy(金币+3):谢谢，今天重复了一遍，用原液凃板，以及稀释液凃板，呵呵。 2010-07-09 08:29:58
引用回帖:
Originally posted by senoy at 2010-07-08 22:36:31:


原液凃板后像磨砂平面，
浓缩过的原液凃板长的和原来一样光滑。浓缩过程是6000rpm,6min,应该是没问题的。

就原液划板吧，找到单克隆就可以了，至于浓缩，不知道哪出问题了，别浓缩了
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4楼2010-07-08 23:02:03
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zhijiangli

金虫 (正式写手)
浓缩过程中是不是菌死了？1
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缘分这东西O(∩_∩)O~
5楼2010-07-09 08:55:07
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