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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RACE产物克隆菌液怎么检测
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xiaoru2010

[交流] 【求助/交流】RACE产物克隆菌液怎么检测 已有6人参与

不提质粒，直接用通用引物（M13）对菌液进行PCR能不能检测有没有连接上？如果可以，酶用一般的Taq就可以吗？？谢谢！！
         昨天，用特异引物的扩增程序和体系做了一下，退火温度用50度，结果只有引物二聚体。我克隆的是RACE3‘和5’端RACE产物，长度为1200左右，有没有做过的，是不是要用race程序啊？

[ Last edited by xiaoru2010 on 2010-7-13 at 10:03 ]
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1楼 2010-07-07 09:56:26
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wzw04

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
就和做普通的PCR一样的，只是模板由DNA换成菌液。
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6楼2010-07-07 15:15:26
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-07 10:27:56
就用载体自带的引物就可检测。
酶就用一般的Taq
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2楼2010-07-07 10:09:50
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-07 10:44:04
当然可以用通用引物检测了

最好把菌液离心了，挑菌体做模板，培养基成分有时候抑制PCR

菌体沾一点就行，不要挑太多
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-07-07 10:42:52
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xiaoru2010

急求高人解答！！！！
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8楼2010-07-13 10:04:19
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