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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】关于重组载体鉴定已有3人参与

现在在做重组载体构建，从酶切结果看，已经构建成功，现在不知道是否需要测序鉴定（片段较长，不知道值不值的测序）？
或者做PCR鉴定？

请虫友们帮忙

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1楼 2010-06-12 14:27:58

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srlee

铁杆木虫 (小有名气)

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zcqcau(金币+2):谢谢 2010-06-12 19:03:56

构建重组载体，有三种方法可以来验证：1）通过酶切来验证，分析序列选择合适的内切酶酶切，通过分析比较酶切片段的大小来确定；2）通过PCR来验证，如果是长片段要选择LA taq，比较容易P出来；3)通过测序来验证，如果是长片段就两端各测一个反应，只要通过比较两端的序列是否正确，基本也就没有问题，不用全长测序的。祝实验顺利！