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zgd6888

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】只知道基因功能,但不知序列位置,怎样克隆目的基因 已有6人参与

只知道基因功能,但不知序列位置,怎样克隆目的基因,怎么办啊?
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-31 19:02:12
搜索其他物种该基因的序列,越近缘的越好,做同源克隆
2楼2010-05-31 16:57:22
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
只能做同源克隆
3楼2010-05-31 18:23:32
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ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
搜索其余物种该基因的序列,作比对,找出保守域,引物在保守区内设计,序列以亲缘关系最近的物种为准,必要时引物可加入简并碱基,多设计几对,没准哪对能用
4楼2010-05-31 19:15:56
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北溟鱼1318

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是想问图位克隆啊。
5楼2010-05-31 21:05:50
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北溟鱼1318

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
知道功能找基因,正向遗传学,图位克隆。
知道基因做功能,反向遗传,转基因。
6楼2010-05-31 21:09:19
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frankstone

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最方便的是先进行同源序列分析,设计保守引物扩增;如果序列变异比较大或者没有十分相近的物种,可以通过基因文库筛选。
做最好的自己。
7楼2012-06-26 19:58:59
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kuileiwawa

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 北溟鱼1318 at 2010-05-31 21:09:19
知道功能找基因,正向遗传学,图位克隆。
知道基因做功能,反向遗传,转基因。

知道功能找基因,做些什么工作?能说得具体些吗?
把小木虫发展壮大!!!
8楼2014-12-10 14:40:08
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北溟鱼1318

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by kuileiwawa at 2014-12-10 14:40:08
知道功能找基因,做些什么工作?能说得具体些吗?...

知道功能找基因,是高级的分子遗传学(请允许我这么说),一般是高水平、耗资的项目。具体的话不好说,网上搜有很多扫盲的知识,但是要做的话不容易。植物上最容易的是拟南芥,一是因为种植周期短,而是有很多可用的marker。医学上有一种方法,统计调查法,就是知道某种病变或生理缺陷,如果这种病变或生理缺陷是由单基因控制的,可以通过大样本调查确定基因的位置,最终克隆这个基因(确定基因的位置和序列、和其编码的蛋白,以及蛋白的功能),前几年我国科学家用这种“笨”方法找到一种病的控制基因,发在顶尖杂志nature genetics上。我不清楚老鼠的图位克隆做到什么程度了。值得注意的是并不是所有的表型都能通过图位克隆找到对应的基因。有些性状是多基因控制的,还有就是图位克隆技术的缺陷,还有就是树木等遗传周期长、分子遗传研究不成熟(没有可用的marker)也是不能定位基因的。---仅供参考。
9楼2014-12-10 19:08:44
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