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dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RNA提取中所用液体怎么处理才能灭活RNAase 已有6人参与

请问虫同胞们
RNA提取中所用液体(氯仿、异丙醇、去离子水、乙醇和SDS等)需要处理以灭活RNAase吗?
如果需要,那用什么方法呢?用DEPC还是另有别的办法?
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commandmp5

金虫 (正式写手)

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lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-29 08:54:23
你都用depc水新鲜配制吧
有机的的确不用depc处理 你觉得氯仿里面还能有有活性的蛋白么
6楼2010-05-29 04:55:54
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lzhwin

木虫 (正式写手)

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scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-28 22:55:03
DD水加DEPC搅拌过夜后高压灭菌,枪头离心管也一样。玻璃器皿180度烘过夜

有机试剂不需要处理,条件允许最好单独准备,不要跟别的实验混用。
如果你不是样品超多或者实验经费很紧张推荐用trizol或者各种山寨版本,比较方便
2楼2010-05-28 18:01:47
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

scelab:大胆的问就是了,谁都不是‘生而知之’的,从来都是生而学之! 2010-05-28 22:55:44
1、为什么有机溶剂不用DEPC处理呀,其中也可能有RNase呀?
2、操作过程中所加的糖原又怎么处理以去除RNase呢?

我是新手,让大家见笑了
3楼2010-05-28 22:05:04
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-29 08:53:57
1.有机试剂本身就是蛋白的变性剂,RNAse是蛋白在有机试剂中就失去了其功能。
2.至于糖原嘛,个人认为是不是可以用DEPC搅拌呢?
4楼2010-05-28 23:41:44
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