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【求助/交流】pcr,酶切,连接,哪步可以省?
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xzx135
铁杆木虫
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专业: 食品科学基础
[交流]
【求助/交流】pcr,酶切,连接,哪步可以省?
已有13人参与
pcr,酶切,哪步可以省?
比如PCR后产物要与T载体连接,筛选阳性克隆后,然后再提质粒,酶切连接到目的载体上,这步有必要吗?PCR产物胶回收后,与目的质粒载体同时双酶切,然后就直接连接不行吗?
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1楼
2010-05-19 16:28:38
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gastrodia
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专业: 微生物遗传育种学
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):给个红包,谢谢回帖交流
直接双酶切,连接,测序
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6楼
2010-05-19 22:30:26
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zestyhuan
新虫
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注册: 2010-05-09
可以省,本人就这么做过,哈哈
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2楼
2010-05-19 16:37:27
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木虫
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注册: 2009-09-03
性别:
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专业: 微生物遗传育种学
直接连片段的话,那样效率比较低吧……
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上班族,学习ing……
3楼
2010-05-19 16:45:28
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miya173
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专业: 作物分子育种
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-19 18:45:44
PCR产物回收,与目的质粒载体同时酶切,然后把需要的片段胶回收做链接。
从来没连到T载体上过
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4楼
2010-05-19 17:57:23
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