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[交流]
【求助/交流】DNase 处理 RNA 的具体步骤（不用试剂盒） 已有4人参与
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| 请教一下用DNase 处理 RNA ，除去DNA的详细步骤，最好是不用试剂盒的。谢谢！ |
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4楼2010-05-19 18:15:03
holyala
木虫 (著名写手)
砖家
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- 专业: 基因组学
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 18:52:29
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 18:52:29
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1) 取10μgRNA样品置于RNase–free的EP管中，进行DNA消化。一般采用20μL体系。 RNA 10 μg DEPC水 n μL 10×DNase I Buffer 2 μL DNase I 2 μL Total volume 20 μL 2）37 ℃，反应10min。 3）加入2μL 1mM EDTA，75 ℃变性10min，冰上冷却。 4）补水至100μL（78μL DEPC–H2O），加入10μL 3M NaAC，2μL糖原，混匀后加入2.5倍体积的无水乙醇，再次混匀，-80 ℃静置30min沉淀RNA，13000 rpm 4 ℃离心20min。70%乙醇（DEPC–H2O配制）洗涤并13000 rpm离心5min。稍微晾干后用DEPC–水溶解沉淀。 |
2楼2010-05-19 17:25:04
zhwenxing
木虫 (著名写手)
尛森蟲
- 应助: 11 (小学生)
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- 注册: 2008-09-09
- 专业: 疫苗学
3楼2010-05-19 17:49:12
5楼2010-05-19 18:17:12
投票:
10