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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pcr中模板量的问题
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xuejinyz1

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】pcr中模板量的问题 已有9人参与

我看到很多普通pcr体系的说明书上，都有写模板加入量的单位为ng.

想请教一下，怎样把多少ng模板量换算成相应体积微升，谢谢!
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1楼 2010-05-17 15:57:52
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pwj

银虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-17 17:50:41
一般我们做PCR的时候50微升体系就加0.5微升，1微升也可以
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2楼2010-05-17 16:17:03
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hyw1989960

木虫 (正式写手)

快乐家族二十八
不同样品中模板浓度不同，这个只能靠定量来确定，最好用核酸蛋白分析仪定量一下，一测就知道每毫升含有的模板的量（质量）。
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快乐家族
3楼2010-05-17 18:22:04
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hitliutao

银虫 (小有名气)
测OD值,确定DNA含量。然后换算成体积
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4楼2010-05-17 18:26:38
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bbyu007

木虫 (正式写手)
25-50ng
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我是笨笨鱼~~~
5楼2010-05-17 18:53:47
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xuejinyz1

铜虫 (初入文坛)

pcr中模板量的问题

假设我测得OD260的值为0.030，请问如何换算成相应的体积？
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6楼2010-05-18 10:34:19
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wangxueqin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by hitliutao at 2010-05-17 18:26:38:
测OD值,确定DNA含量。然后换算成体积

同意观点
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7楼2010-05-18 10:45:23
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wangxueqin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xuejinyz1 at 2010-05-18 10:34:19:
假设我测得OD260的值为0.030，请问如何换算成相应的体积？

我们平时测的时候，直接会出来一个ng/ul的值，你说的OD260不知道是否就是A260，我们平时不用这个参数，只看一下260/280 代表DNA的纯度，再看一下浓度就行，不知道你们用的是什么仪器？
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8楼2010-05-18 10:48:23
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xuejinyz1

铜虫 (初入文坛)

pcr中模板量的问题

我就直接用UV-9100紫外分光光度计来检测OD值，因为是在提取rna后进行浓度测定的。通常情况OD260/280为200-400ng/ul。
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9楼2010-05-18 11:02:50
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qingxiong

木虫 (正式写手)
xuejinyz1(金币+1): 2010-05-29 15:20:00
我们一般都是在紫外线下估量的，一般是这样认为的在紫外灯下能勉强看见就默认为50ng
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10楼2010-05-18 11:38:44
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