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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】测序大量杂峰
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liuwei78

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】测序大量杂峰 已有3人参与

质粒是用试剂盒提取的，唯一一点区别是最后用灭菌的去离子水溶解的。

寄出去测序，反馈回来的结果是有大量杂峰，信号很弱。看反馈的图谱，刚开始杂峰只有一些，后面就很乱，一个反应都测不全。不过仅有的序列同我的目的片段比对是完全吻合的。

请问大家，我接下来要怎样优化这样的质粒重新测序呢？
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1楼 2010-05-14 08:30:41
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amilie030312

金虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):欢迎交流~~ 2010-05-14 16:35:25
你菌P检测做没啊？看看菌P结果好不好，是不是你弄出来的不是单克隆菌落啊？
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5楼2010-05-14 16:31:25
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
其实用水还好一些啊，TE是长期储存用的，你可以再重新过下柱子，就PCR纯化的柱子就行，祝你成功～
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2楼2010-05-14 08:40:00
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-14 16:35:42
可能跟引物有关系，楼主测序用的什么引物，我用T7引物，就永远的是杂峰一片，换SP6、M13F/R就很好
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3楼2010-05-14 09:23:06
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amilie030312

金虫 (正式写手)
不提质粒直接用摇好的菌液测序试试
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4楼2010-05-14 16:30:36
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