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erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR扩增怎么就没有条带!已有17人参与

我想请问一下,我最近做PCR反应的时候怎么就没有目的基因片段产物???
是不是以下条件出问题了?

1)退火温度
2)引物浓度
3)模板浓度
4)dNTP浓度
5)Taq PlusI 聚合酶浓度
6)10X PCR buffer.

dNTP、Taq Plus聚合酶、10X PCR buffer 都是新的,剩下第一和第二的因素,
我想请问的是我一直P不出条带出来,是不是引物或者模板的问题??
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小白兄

金虫 (小有名气)

做什么PCR?大小多少?GC含量怎么样?引物设计匹配度怎么样?关系到退火温度和延伸时间。个人觉得可以尝试梯度退火尝试下。如果再不出来,就要考虑引物的问题,是设计不合理还是引物合成有问题。欢迎继续交流
时光如流水,匆匆而过。
14楼2010-05-16 12:34:02
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