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bjlumang

铁杆木虫 (知名作家)

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[交流] 【讨论】PCR-DGGE 已有1人参与

问个问题哈，向大家。我采用PCR-DGGE的方法从土壤中提取的总DNA中获得了电泳图，有几条条带，那么是否可以对每个条带的DNA再测序来知道这个条带主要是什么菌呢？用什么方法？

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1楼 2010-05-08 08:47:44

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ygbxk

铁杆木虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

DGGE后出来的条带可以进行测序，但是不一定是单一菌种的，因为DGGE只对不同长度的PCR产物进行分离，长度一样的可能就分离不出来了。我一般采用两种方法，一是DGGE割胶纯化，对目的条带割胶后再用DGGE纯化得到单一条带后再直接测序，但是这个方法比较麻烦，操作不好的话还很容易污染；再一个就是对割胶产物进行克隆然后测序，也不简单呵呵。

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2楼2010-05-08 12:32:31

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