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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【问题反馈】关于转化问题
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xucan0901

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【问题反馈】关于转化问题 已有7人参与

经常听说明书上说，转化时，连接混合物不能超过感受态的10%，
请问这是什么原因啊？Sample TextSample TextSample Text
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1楼 2010-05-04 22:29:52
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):high hand~ :tiger23: 2010-05-05 15:28:15
因为连接液含有一些盐等能够抑制转化效率
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2楼2010-05-04 22:44:00
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ydniu

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-05-04 22:44:00:
因为连接液含有一些盐等能够抑制转化效率

学习了！谢谢！
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3楼2010-05-04 23:02:54
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zxl493

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我不是搞这方面的
很想了解      我顶
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4楼2010-05-05 00:03:58
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-05 15:28:48
一般是5%-10%。
少量，质粒/菌落太低，过量后盐溶液是一部分影响因素，外膜的通透性降低。
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5楼2010-05-05 01:53:50
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刘鹏飞83

金虫 (小有名气)
学习一下
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书山有路勤为径！
6楼2010-05-05 08:29:05
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大力水手2892

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我不是搞这方面的
很想了解      我顶
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7楼2010-05-05 08:39:41
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todouhy

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我最近也是要做这方面转化，以前从没有做过感受态细胞，你做的好的话指教一二，谢谢啊！
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8楼2010-05-05 13:22:20
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-06 22:47:52
引用回帖:
Originally posted by todouhy at 2010-05-05 13:22:20:
我最近也是要做这方面转化，以前从没有做过感受态细胞，你做的好的话指教一二，谢谢啊！

1、如果使用普通的E.coli系列的工程菌株，做感受态是很容易的，一般的制备感受态的方法都能差不多，只是转化效率高低的问题，但是一般都够用了。

2、电转化和化学转化的制备方法差异多多，需要注意。

3、制备完毕后的储存备用，降温过程等注意细节，一般问题不大。

4、常用的工程菌株公司现成的都有，可以购买，注意干冰运输哦！这也是省钱省事的方法，往往自己去做，费时间，有时候还控制不好。

5、一些革兰氏阴性菌不容易制备感受态。条件需要自己好好摸索。

6、转化的条件要把握，不一定是competentcell制备问题。
常交流！
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9楼2010-05-06 21:19:30
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