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xucan0901

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 【问题反馈】关于转化问题已有7人参与

经常听说明书上说，转化时，连接混合物不能超过感受态的10%，
请问这是什么原因啊？

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1楼 2010-05-04 22:29:52

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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-06 22:47:52

引用回帖:

Originally posted by todouhy at 2010-05-05 13:22:20:
我最近也是要做这方面转化，以前从没有做过感受态细胞，你做的好的话指教一二，谢谢啊！

1、如果使用普通的E.coli系列的工程菌株，做感受态是很容易的，一般的制备感受态的方法都能差不多，只是转化效率高低的问题，但是一般都够用了。

2、电转化和化学转化的制备方法差异多多，需要注意。

3、制备完毕后的储存备用，降温过程等注意细节，一般问题不大。

4、常用的工程菌株公司现成的都有，可以购买，注意干冰运输哦！这也是省钱省事的方法，往往自己去做，费时间，有时候还控制不好。

5、一些革兰氏阴性菌不容易制备感受态。条件需要自己好好摸索。

6、转化的条件要把握，不一定是competentcell制备问题。
常交流！