应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请大家看一下我设计的一个ELISA实验
51/1返回列表
查看: 955  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小周

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】请大家看一下我设计的一个ELISA实验 已有4人参与

最近用细胞表达一种蛋白，设计ELISA方法进行定量。
蛋白上连着一个HIS-TAG ,我打算将抗HIS-TAG的抗体包到酶标板上，封闭，上样，再加抗该种蛋白的抗体，该抗体上偶联HRP，TMB显色。
麻烦各位看一下我这样做有问题吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-04-28 16:09:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小周

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by winter_gates at 2010-04-28 16:50:03:
应该会有问题……
你的His暴露的充分度怎么样？反过来还好一些……
再者，ELISA本身就是半定量，你没有标样怎么定量？

HIS-TAG 的暴露度，不太清楚。ELISA 是可以用来定量啊。反过来，你是说用抗该种蛋白的抗体用来包被，加样，加 HIS-TAG 抗体（为鼠抗HIS-TAG）,然后加抗鼠-HRP标记的二抗吗？
您说的很有道理，谢谢了啊！
赞一下 回复此楼
4楼2010-04-28 17:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
★ ★
1949stone(金币+1): 2010-04-28 18:05
1949stone(金币+1): 2010-04-28 18:05
1949stone(金币+1): 2010-04-28 18:05
lstt09nk(金币+1): 2010-04-28 18:06
lstt09nk(金币-2):1949stone斑斑网络问题，现减去部分金币，请虫友见谅~~ 2010-04-28 21:08
应该会有问题……
你的His暴露的充分度怎么样？反过来还好一些……
再者，ELISA本身就是半定量，你没有标样怎么定量？
赞一下(5人) 回复此楼
For my life！
2楼2010-04-28 16:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这样不行的，抗his-tag的抗体可不只识别你重组蛋白的his标签，，，，
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-04-28 16:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 小周 at 2010-04-28 17:25:48:



HIS-TAG 的暴露度，不太清楚。ELISA 是可以用来定量啊。反过来，你是说用抗该种蛋白的抗体用来包被，加样，加 HIS-TAG 抗体（为鼠抗HIS-TAG）,然后加抗鼠-HRP标记的二抗吗？
您说的很有道理，谢谢了啊！

ELISA只能作为半定量使用，是不能绝对定量的，只要是半定量就需要你做标准曲线，不然的话你怎么量化？
赞一下(1人) 回复此楼
For my life！
5楼2010-05-03 10:51:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 277 数一104，学硕，求调剂 +5 瓶子PZ 2026-04-09 5/250 2026-04-09 22:46 by LHGeng
[考研] 289求调剂 +4 L1ttleTiger 2026-04-04 4/200 2026-04-09 19:53 by xiayizhi
[考研] 316求调剂 +3 想读研究生( ?∵ 2026-04-07 3/150 2026-04-09 17:31 by wp06
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 工科273调剂 +4 X1999 2026-04-09 5/250 2026-04-09 16:05 by wp06
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 生物学学硕，初试351分，求调剂 +4 …～、王…～ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
[考研] 307分材料专业求调剂 +12 Hll胡 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:33 by luoyongfeng
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-06 6/300 2026-04-08 10:40 by 逆水乘风
[考研] 计算机11408 287 求调剂 +3 LiLe5 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:15 by shanqishi
[考研] 一志愿南科大生物学297分，求调剂推荐 +8 Y-yyusx 2026-04-06 9/450 2026-04-07 19:38 by biomichael
[考研] 305分求调剂 +3 哈_哈_哈_哈_哈 2026-04-04 5/250 2026-04-07 14:49 by 哈_哈_哈_哈_哈
[考研] 材料专硕283求调剂 +17 试试看呗 2026-04-04 18/900 2026-04-06 09:24 by 286640313
[考研] 材料与化工371求调剂 +14 陪琳看海 2026-04-04 15/750 2026-04-06 06:59 by houyaoxu
[考研] 341求调剂 +3 学无止境，冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
[考研] 085601，一志愿厦大334复试被刷求调剂 +13 曾仰之 2026-04-03 15/750 2026-04-04 20:13 by dongzh2009
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 348分环境工程·调剂 +10 吴彦祖24k 2026-04-03 11/550 2026-04-04 14:19 by 无际的草原
[考研] 278求调剂 +6 Yy7400 2026-04-03 6/300 2026-04-04 09:53 by zhangdingwa
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭