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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RACE 试剂盒问题
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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】RACE 试剂盒问题 已有2人参与

在RACE smart race cdna amplification kit 的说明书里面提到了BD advantage 2 polymerase mix


请问是不是必须要用BD advantage 2 polymerase mix呢？？谢谢

其他的牌子的话，能否推荐一下呢？
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1楼 2010-04-27 11:10:57
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-04-27 11:58
smart RACE关键是要提出高质量的RNA然后能顺利合成第一链cDNA，后面的扩增只要你的引物特异性比较好，tm高于72度就可以通过touchdown做出来，当然前提是你的目的基因在你的提得RNA中要有表达，用什么taq酶扩增并不重要，我曾经使用了全世金的transstart taq扩增出我的目的条带，但是其特异性不如advantage 2 polymerase Mix
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3楼2010-04-27 11:30:08
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gastrodia

金虫 (正式写手)
不一定，使用热启动的保真度高一点就可以，
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2楼2010-04-27 11:19:23
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pidou213

木虫 (正式写手)
能否推荐一二呢？？

advantage的太贵了
引用回帖:
Originally posted by gastrodia at 2010-04-27 11:30:08:
smart RACE关键是要提出高质量的RNA然后能顺利合成第一链cDNA，后面的扩增只要你的引物特异性比较好，tm高于72度就可以通过touchdown做出来，当然前提是你的目的基因在你的提得RNA中要有表达，用什么taq酶扩增并不 ...

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见得多爱的多
4楼2010-04-27 11:53:11
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gastrodia

金虫 (正式写手)
我在上面已经说了啊，你可以使用热启动酶即可（如全式金的transstart或者宝生物的EXTAQ hot start version），实验条件同，只是把PCR的酶和缓冲液换掉
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6楼2010-04-27 16:00:08
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