24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4442)
>虫友互识 (583)
>导师招生 (481)
>找工作 (288)
>文献求助 (287)
>论文投稿 (246)
>职场人生 (243)
>休闲灌水 (159)
>考博 (148)
>考研 (105)
>硕博家园 (90)
>博后之家 (86)
>学术会议 (77)
>招聘信息布告栏 (66)
>医学 (61)
>有机交流 (32)

返回列表

pptony113

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 156.8
散金: 6
帖子: 96
在线: 15.7小时
虫号: 825512
注册: 2009-08-10
性别: GG
专业: 植物学研究的新技术、新方

[交流] 【求助/交流】western blot用奶粉封闭的原理已有10人参与

我知道用牛奶封闭是为了防止背景过高，但具体的原理是什么？请帮忙解释一下谢谢

回复此楼

» 猜你喜欢

TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有271人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点已经有0人回复
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用已经有0人回复
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展已经有0人回复
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点已经有0人回复
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

Western Blot 显影时PGDF膜上全是荧光，求解，有没有懂的呀已经有15人回复
Western Blot实验的蛋白条带都连在一起已经有37人回复
提供Western blot技术服务已经有63人回复
Western-blot 膜封闭时间？已经有7人回复
Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助已经有22人回复
【求助/交流】westernblot 已经有10人回复
【分享】新手上路 Western blot问题集合已经有6人回复
【求助/交流】western blot 已经有35人回复
原创首发：Tips for Western Blot-一些小技巧而已已经有13人回复

1楼 2010-01-25 17:38:06

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yang0071

木虫 (职业作家)

应助: 207 (大学生)
金币: 1573.4
散金: 9319
红花: 21
帖子: 4041
在线: 647.7小时
虫号: 50941
注册: 2004-07-15
性别: GG
专业: 生物化学

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+1): 1-26 10:59

引用回帖:

Originally posted by 雨中蜗牛 at 2010-01-25 19:07:40:
用脱脂乳封闭是让在亚硝酸纤维膜上没有结合样品蛋白的地方结合上蛋白，防止在与一抗作用时与杂蛋白结合，影响实验结果。

第1句和第3句完全正确，第2句错了，应该是防止一抗非特异性结合到膜上面

赞一下(15人)

回复此楼

3楼2010-01-25 19:14:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 634.2
帖子: 111
在线: 20.1小时
虫号: 874201
注册: 2009-10-16
性别: MM
专业: 免疫生物学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

脱脂奶是最常用的经济配方，用这种封闭剂由于里面可能有痕量的生物素和碱性磷酸酶，可能造成背景污染而不适合生物素—亲和素的检测方法（如果用了生物素标记的Marker而且结果背景较高，分析结果也有可能是受此影响），脱脂奶也不适合碱性磷酸酶检测（AP）方法。
如果采用碱性磷酸酶检测系统，封闭剂最好用6%酪蛋白+1%聚乙烯吡咯烷酮+10mmol/L EDTA磷酸缓冲盐加热65度1小时确保碱性磷酸酶失活（可以加0.05%叠氮化钠，新鲜最好）。
但是叠氮钠(NaN3)对辣根过氮化物酶(HRP)有灭活作用，如果用HRP检测系统则封闭液不要加叠氮化钠为好。

赞一下(4人)

回复此楼

9楼2010-02-04 16:36:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖