应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 有关BL21(DE3)的基因敲除的问题
51/1返回列表
查看: 4288  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

生物狗小落

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢
1楼 2018-10-22 10:07:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

司马错

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by nansty at 2019-03-14 17:58:19
你好，我想请教一下，你提到的JM109（DE3），DH5a（DE3）这些菌株有商业化的吗？如果有的话你是从哪家买的？如果是实验室构建的，方便告知哪个实验室有保存这样的菌吗？非常感谢。...

北京华越洋 好像卖这些菌株 ，另外关于大肠的基因编辑 也可以参见下文
Development of a fast and easy method for Escherichia coli genome editing with CRISPR/Cas9
赞一下 回复此楼
优秀成为习惯
8楼2019-08-13 23:19:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

donkey2017

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用pCad和pTargetF构建Crispr敲除系统，可以私信交流
赞一下 回复此楼
2楼2018-10-23 09:07:36
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwq652

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

bl21，建议不要用RED系统，徒劳。看看有没有成功的报道就知道了。如果只是看重BL21(DE3)中的T7的话，可以尝试在其他同源化T7的菌株里做，现在有很多了，比如JM109（DE3），DH5a（DE3），甚至自己在K12里做了溶源化在做RED都比直接在BL21(DE3)中来的有效快速
赞一下(1人) 回复此楼
一念错，便觉百行皆非，防之当如渡海浮囊，勿容一针之罅漏
3楼2018-10-28 15:06:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwq652

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

也可以做crispr系统，确切的是联合使用CRISPR和RED系统，参见
《Multigene Editing in the Escherichia coli Genome via the CRISPR-Cas9 System》
《Coupling the CRISPR/Cas9 System with Lambda Red Recombineering Enables Simplified Chromosomal Gene Replacement in Escherichia coli》
这几个质粒addgene上都有的卖的，会收取手工费，当然前提你得是非盈利机构
赞一下 回复此楼
一念错，便觉百行皆非，防之当如渡海浮囊，勿容一针之罅漏
4楼2018-10-28 15:11:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854求调剂 +12 门路摸摸 2026-04-15 13/650 2026-04-16 00:14 by Art1977
[考研] 初试324 中药学 一志愿天中医 求调剂 +3 李的Lucky 2026-04-10 3/150 2026-04-15 23:54 by 陈皮皮
[考研] 284求调剂 +21 让我上岸吧阿西 2026-04-09 21/1050 2026-04-15 21:53 by noqvsozv
[考研] 一志愿沪9，生物学326求调剂 +7 刘墨墨 2026-04-15 7/350 2026-04-15 18:51 by 浮云166
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-14 7/350 2026-04-15 14:39 by 黑科技花岗岩
[基金申请] RY：中国产出的科学垃圾论文，绝对数量和比例都世界第一 +6 zju2000 2026-04-14 17/850 2026-04-14 14:34 by jurkat.1640
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[基金申请] 2026 WR青拔 +3 冬日阳光CAS 2026-04-09 6/300 2026-04-13 18:40 by liuchb715
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 。 +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 求调剂，一志愿材料科学与工程985，365分， +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸，感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 调剂 +19 小张ZA 2026-04-10 20/1000 2026-04-10 22:08 by 猪会飞
[考研] 初试分332，一志愿报考西北工业大学， +11 故人?? 2026-04-09 11/550 2026-04-09 21:54 by JineShine
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学， +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 332，085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭