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载体双酶切连接总是自连 已有2人参与
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| pCDH质粒中连入500bp左右的片段，酶切位点为XbaI 和BamH I，质粒做双酶切时同时做了单酶切单酶切对照，，单酶切都能够切开，双酶切也能切成一条线型条带，插入片段为PCR产物，乙醇回收后做双酶切。16℃连接过夜后转化，长出的菌落PCR都是阴性,不加插入片段的对照组和实验组长出的菌落数量差不多，有时候对照组菌落甚至更多，已经做了好几次了，不知道什么原因，求解答 |
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2楼2018-10-11 13:24:10
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