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不明非

新虫 (初入文坛)

[交流] real time PCR结果分析

求围观。。。

我做real time PCR荧光曲线中管家基因结果很不正常，求哪位高手帮忙分析一下原因管家基因线是最前面的那些

real time  PCR结果分析
1.jpg
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1楼 2017-07-27 11:07:55
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wallee

新虫 (初入文坛)
★
不明非(金币+2): 谢谢参与
木虫已死

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12楼2017-07-27 15:47:10
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相视而笑

新虫 (小有名气)
★
不明非(金币+2): 谢谢参与
初步怀疑cdna加多了，稀释后做

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13楼2017-07-27 18:38:18
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小骆驼321

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以考虑将PCR产物，直接跑一下琼脂电泳看看，你提取的RNA没有DNA污染吧~~
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20楼2017-07-28 11:49:04
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yumao8510

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
CT值太低了，先稀释后再做一次看看

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21楼2017-07-31 09:09:13
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stabilized

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
产物电泳先看看，比对Marker，估计下浓度
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22楼2017-07-31 09:42:53
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不明非

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 小骆驼321 at 2017-07-28 11:49:04
你可以考虑将PCR产物，直接跑一下琼脂电泳看看，你提取的RNA没有DNA污染吧~~

RNA经过DNase消化过，然后直接用消化后的RNA做PCR没有扩出来条带，应该是没问题的
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23楼2017-08-02 10:23:18
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不明非

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by yumao8510 at 2017-07-31 09:09:13
CT值太低了，先稀释后再做一次看看

我用的是16s 本身模板量就大，我稀释后做了一次但是Ct值依然很小，我准备换一个管家基因，谢谢啦
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24楼2017-08-02 10:30:46
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不明非

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by stabilized at 2017-07-31 09:42:53
产物电泳先看看，比对Marker，估计下浓度

16s的浓度本身就很大，如果目的基因表达量不高再经过稀释基本就不能出来结果了
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25楼2017-08-02 10:33:39
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FEN1

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到同样问题

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28楼2017-10-13 20:43:32
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赵英0709

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不排除你操作……

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29楼2018-03-15 12:09:25
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tzynew2楼
2017-07-27 11:24   回复  
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tzynew3楼
2017-07-27 11:24   回复  
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tzynew4楼
2017-07-27 11:24   回复  
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syhorchid5楼
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syhorchid6楼
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syhorchid7楼
2017-07-27 12:00   回复  
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不明非8楼
2017-07-27 12:16   回复  
引用回帖:
2楼: Originally posted by tzynew at 2017-07-27 11:24:22

slytjiaofei9楼
2017-07-27 12:19   回复  
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slytjiaofei10楼
2017-07-27 12:19   回复  
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slytjiaofei11楼
2017-07-27 12:19   回复  
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nono200914楼
2017-07-27 21:02   回复  
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nono200915楼
2017-07-27 21:02   回复  
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nono200916楼
2017-07-27 21:02   回复  
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sz_kebaoyuan17楼
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sz_kebaoyuan18楼
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