24小时热门版块排行榜    

查看: 2200  |  回复: 12

木先生kkkk

新虫 (初入文坛)

[求助] 连接转化一直没结果

请教一下各位,最近在做克隆,连接用TAKARA 19T载体连,体系为T载体1微升,目的基因是2微升(片段在750bp左右),连2个半小时。转化用5微升加到50微升的感受态细胞,涂布LB培养基上过夜没长菌落出来。
是不是哪里出了问题,之前这样做就没有问题!

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

前行的璐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 木先生kkkk at 2017-06-10 09:58:27
有木有人

你好,有没有做对照,排除是不是感受态的问题?
3楼2017-06-10 11:08:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cclh

新虫 (初入文坛)

是不是时间短了,我的跟你差不多,会连过夜,还有温度

发自小木虫Android客户端
4楼2017-06-11 19:10:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

perfect1020

新虫 (初入文坛)

7楼2017-06-13 00:24:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

木先生kkkk

新虫 (初入文坛)

2楼2017-06-10 09:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵英0709

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-12 23:03:19
你好,你有没有加连接的酶和buffer,我都是16摄氏度过夜连接,而且我克隆的基因近2000,是可以连接上去的,我也用的takara的

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-06-12 17:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cai3110274

木虫 (职业作家)

夫天地者万物之逆旅
6楼2017-06-12 19:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

030Selma

金虫 (正式写手)

目的基因片段末端有A吗?

发自小木虫IOS客户端
8楼2017-06-13 05:07:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengshen2005

银虫 (正式写手)

9楼2017-06-13 06:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傲娇的小马尾

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by fengshen2005 at 2017-06-13 06:34:44
目的基因浓度低

想请教您,如果目的基因浓度低,怎样提高连接成功率?
10楼2017-07-26 18:15:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 木先生kkkk 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +5 @taotao 2026-03-19 5/250 2026-03-24 21:07 by greychen00
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:17 by pswait
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 7/350 2026-03-24 15:24 by cuifj
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗? +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
信息提示
请填处理意见