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大肠表达包涵体复性问题已有3人参与
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虫友们好， 最近再用pET-28a载体(BL21 DE3宿主)表达外源的原核蛋白，但是形成包涵体，后面降低了诱导剂溶度及温度(0.01mM IPTG诱导，20℃，低OD=0.2-0.3时诱导)，但是包涵体的情形仍没有改善。在这里向大家请教，哪位大牛能帮忙想想办法？ 我的目的蛋白是双亚基(异亚基)。原始氨基酸序列是信号肽+α亚基+连接肽+β亚基。蛋白成熟过程中连接肽经剪切，仅剩α亚基和β亚基相连。不知道我现在表达形成的包涵体连接肽有没有被剪切，如果采取包涵体复性，蛋白不知道有没有活性。  |
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5楼2017-05-28 22:00:26
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