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大片段基因连接，转化问题 已有4人参与
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我想把一个6.5kb的片段倒入4.7kb的载体中，insert 是从一个质粒上切下来的，保证有相同的酶切位点，连接体系试过1:1，2:1, 3:1，热激，都不成功，已经做了快俩月了，求大神帮忙！ 发自小木虫IOS客户端 |
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7楼2017-03-23 09:01:17
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11楼2017-03-23 10:59:20
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13楼2017-03-23 14:40:16
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我之前连过六千多的片段。我当时的载体是八千多，也是连了好久连不上，后来在片段中间找了个酶切位点，切下来。相当于三个东西一起连。终于做出来了。按照这个方法。一口气做出来四个这种克隆。你这个可以把比例换过来试试啊，毕竟你是片段大于载体。还有感受态的转化效率要高啊。 发自小木虫Android客户端 |
14楼2017-03-23 15:06:10
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试试电转？电转化效率不是一般的高。不成功是板上没长还是都长空载？ 发自小木虫IOS客户端 |
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