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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大片段基因连接，转化问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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mmqlhy

新虫 (初入文坛)

[求助] 大片段基因连接，转化问题 已有4人参与

我想把一个6.5kb的片段倒入4.7kb的载体中，insert 是从一个质粒上切下来的，保证有相同的酶切位点，连接体系试过1:1，2:1, 3:1，热激，都不成功，已经做了快俩月了，求大神帮忙！

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1楼 2017-03-22 21:47:11
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时光、过客

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小冀- at 2017-03-23 09:01:17
可能没连上吧，我们大片段做的时候摩尔浓度一般用5:1或者10:1，多得是片段，片段比较大的不太好连

请问摩尔浓度比例具体怎么算？需要算上片段大小吗？

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12楼2017-03-23 11:38:28
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秉秉的法兰西

新虫 (小有名气)
怎么个不成功法？

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2楼2017-03-22 23:44:45
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秉秉的法兰西

新虫 (小有名气)
是不长菌，还是都是假阳性？

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3楼2017-03-22 23:45:21
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mmqlhy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秉秉的法兰西 at 2017-03-22 23:44:45
怎么个不成功法？

有过两次假阳性，其余几次都是不长菌

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4楼2017-03-23 01:40:12
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