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hai101214

新虫 (初入文坛)

[交流] 电泳结果分析求助 已有2人参与

最近跑凝胶电泳,出来结果,但不是太会看,想麻烦各位老师帮忙看一下,1%的琼脂糖凝胶,100v半个小时,marker是100,200,300,400。。。1ul的loading buffer加5ul样品,横杠后面1,2,3,4,5分别代表的是56,58,60,62,64度,横杠前面的b1,b2,b3,w1,w2,w3,t1,t2,t3分别代表一个基因的不同序列,能不能麻烦各位帮忙选一个最适合的序列和最适合引物,其中w组两次跑胶都没有出来,请教了实验室同学可能是引物有问题,准备重新设计引物了,谢谢各位了!

电泳结果分析求助
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电泳结果分析求助-1
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电泳结果分析求助-2
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原海亮

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的问题没看太明白,选择哪个序列是指目的基因的序列么,这个不应该是你自己根据实验需要来确定么。另一个是选择引物?还是退火温度?感觉你能扩增出来的片段特异性都挺好的,只要大小正确觉得选择一个中上的退火温度即可。

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2017-03-06 09:16:33
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hai101214

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2017-03-06 09:16:33
你的问题没看太明白,选择哪个序列是指目的基因的序列么,这个不应该是你自己根据实验需要来确定么。另一个是选择引物?还是退火温度?感觉你能扩增出来的片段特异性都挺好的,只要大小正确觉得选择一个中上的退火温 ...

谢谢您!因为我是每个目的基因设计了三个序列,现在跑的结果想在三个序列里面选一个好一点的,横杠后面是56.58.60.62.64五个退火温度,想选择一个合适的退火温度

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3楼2017-03-06 14:53:18
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爱萌的小天使

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个是梯度退火吧,我觉得选择一个最亮的条带就可以了,后面没跑出来的可能是设计的不好,可以弃
4楼2017-03-07 15:52:19
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