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猪皮明胶（pork gelatin，大约 300 bloom) 的SDS-page电泳方法及结果分析？ 已有3人参与
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试验中需要测定猪皮明胶（pork gelatin,大约300 bloom，购自Sigma）的SDS-page图谱，测定其分子量，及研究不同加工方法对其分子量是否有影响。 已经阅读文献，发现几篇论文中测得的猪皮明胶原子量分布均比较分散，并无确定的具体数值。很多文献都对猪皮明胶做了进一步处理（例如酶解，水解），然后将二者进行对比。 比如文献：Zhang, Z. K., Li, G. Y., Shi, B. (2006). Physicochemical properties of collagen, gelatin and collagen hydrolysate derived from bovine limed split wastes, Journal of the Society of Technologists and Chemists, 90, 23-28 试验方法: Zhang 等人将样品与0.5M的Tris-Hcl缓冲液混合（1%SDS， 10%glycerol,0.01%bromophenol blue, pH 6.8），煮沸5分钟。取15微升混合液，注射入10%的gel well中，运行120min。然后使用0.25% Coomassie Brillaint Blue R250染色45分钟，最终使用7.5%醋酸+5%甲醇脱色。 其SDS PAGE图谱如图所示：其中1为蛋白质标准，2为collagen，3为gelatin，4分水解后的collagen 他们也是简单讨论了gelatin的分子量分布在300KDa以下，分布较宽 求助如下问题： 1）猪皮明胶的SDS-page图谱是否就是如图所示这样子的？分子量分布非常分散，并无类似Collagen （第2条谱带）的那种具有具体数值的分子量分布? 2）这种很宽的分子量分布，是否由于gelatin提取过程中蛋白质变性造成（gelatin是collagen通过蛋白变性得到的）？有人告诉我说变性蛋白质的图谱就是类似的，这种说法是否正确？ 感谢帮助  gelatin-SDS page.jpg |
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