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电泳染色效果异常求助
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最近做等电聚焦电泳,目的蛋白条带在6KD左右,其他步骤及过程正常,就是染色显色一步出现问题。染色后的Marker,BSA对照,人白蛋白,都能很好的染色,唯独我们的目的条带蛋白不能被染色。肉眼观察,能够观察到类似免疫沉淀反应的白色条纹痕迹。几乎可以判断就是目的蛋白。但是它不能被染色,让人很是无奈,求大侠帮助。 补充。我们是药厂QC,目的蛋白是已经做过千万遍的很固定的东西,纯化好后纯度已经很高了。以前做等电聚焦一切正常,虽然目的条带淡点但是还不至于像现在一样不能染色。染色液,固定液,都有新配过。可以排除试剂及操作原因。并且,通过BSA,及人白蛋白的正常显色,也能表明体系是正常的。但是这样一来,目的蛋白不显,就更是让人不好理解了。 现在我们在进行扩建,工艺放大,或许有些不被注意的变动影响了实验结果,求各路高手帮忙分析下。不胜感激。 |
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