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空蓝Y劫

新虫 (小有名气)

[求助] 电泳染色效果异常求助

最近做等电聚焦电泳，目的蛋白条带在6KD左右，其他步骤及过程正常，就是染色显色一步出现问题。染色后的Marker，BSA对照，人白蛋白，都能很好的染色，唯独我们的目的条带蛋白不能被染色。肉眼观察，能够观察到类似免疫沉淀反应的白色条纹痕迹。几乎可以判断就是目的蛋白。但是它不能被染色，让人很是无奈，求大侠帮助。

补充。我们是药厂QC，目的蛋白是已经做过千万遍的很固定的东西，纯化好后纯度已经很高了。以前做等电聚焦一切正常，虽然目的条带淡点但是还不至于像现在一样不能染色。染色液，固定液，都有新配过。可以排除试剂及操作原因。并且，通过BSA，及人白蛋白的正常显色，也能表明体系是正常的。但是这样一来，目的蛋白不显，就更是让人不好理解了。

现在我们在进行扩建，工艺放大，或许有些不被注意的变动影响了实验结果，求各路高手帮忙分析下。不胜感激。
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1楼 2013-12-20 11:16:02
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