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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xdbotany

新虫 (初入文坛)

[交流] 疑惑,请问为什么在做启动子活性的时候测gus酶活,而不做gus基因的定量PCR? 已有2人参与

如题,基因发挥功能是通过蛋白行使的,但是现阶段很多研究基因对环境的响应是通过qRT-PCR完成的,那研究启动子活力的时候,能不能通过对GUS基因的qRT-PCR结果来判断启动子活力呢?拜谢。
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xdbotany

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sunjiutong at 2017-01-12 01:04:47
你说的有一定道理,但是,若真做qRT_PCR,你拿什么作为参照呢?

如果是遗传转化得到后代苗子,如T1代烟草和拟南芥,可以选择植物自身的内参,如果是瞬时表达,是否可以使用启动子部分作为内参?
5楼2017-01-12 18:52:48
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sunjiutong

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主爱思考。请问做qRT-PCR简单还是做GUS染色简单,qRT-PCR结果更可靠更直观还是GUS染色更可靠更直观?这就好比你从学校到宿舍本来步行5分钟就到,干嘛还要开车?
所谓梦想,只有醒来才有可能实现
2楼2017-01-11 16:32:20
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xdbotany

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunjiutong at 2017-01-11 16:32:20
楼主爱思考。请问做qRT-PCR简单还是做GUS染色简单,qRT-PCR结果更可靠更直观还是GUS染色更可靠更直观?这就好比你从学校到宿舍本来步行5分钟就到,干嘛还要开车?

谢谢你的回答,再多问一句,我觉得研究启动子活力的时候,是不是做GUS基因的qRT-PCR更能真是反映启动子的活力呢?因为GUS基因转录量直接和启动子启动能力大小相关,而蛋白是转录后再翻译的,蛋白合成的因素受很多因素影响,而且时效性不如RNA。当然如果做qRT-PCR还是要染色做验证的。
3楼2017-01-11 23:58:32
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sunjiutong

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你说的有一定道理,但是,若真做qRT_PCR,你拿什么作为参照呢?

发自小木虫Android客户端
所谓梦想,只有醒来才有可能实现
4楼2017-01-12 01:04:47
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