24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2923  |  回复: 8

xdbotany

新虫 (初入文坛)

[交流] 疑惑,请问为什么在做启动子活性的时候测gus酶活,而不做gus基因的定量PCR? 已有2人参与

如题,基因发挥功能是通过蛋白行使的,但是现阶段很多研究基因对环境的响应是通过qRT-PCR完成的,那研究启动子活力的时候,能不能通过对GUS基因的qRT-PCR结果来判断启动子活力呢?拜谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunjiutong

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主爱思考。请问做qRT-PCR简单还是做GUS染色简单,qRT-PCR结果更可靠更直观还是GUS染色更可靠更直观?这就好比你从学校到宿舍本来步行5分钟就到,干嘛还要开车?
所谓梦想,只有醒来才有可能实现
2楼2017-01-11 16:32:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xdbotany

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunjiutong at 2017-01-11 16:32:20
楼主爱思考。请问做qRT-PCR简单还是做GUS染色简单,qRT-PCR结果更可靠更直观还是GUS染色更可靠更直观?这就好比你从学校到宿舍本来步行5分钟就到,干嘛还要开车?

谢谢你的回答,再多问一句,我觉得研究启动子活力的时候,是不是做GUS基因的qRT-PCR更能真是反映启动子的活力呢?因为GUS基因转录量直接和启动子启动能力大小相关,而蛋白是转录后再翻译的,蛋白合成的因素受很多因素影响,而且时效性不如RNA。当然如果做qRT-PCR还是要染色做验证的。
3楼2017-01-11 23:58:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunjiutong

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你说的有一定道理,但是,若真做qRT_PCR,你拿什么作为参照呢?

发自小木虫Android客户端
所谓梦想,只有醒来才有可能实现
4楼2017-01-12 01:04:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xdbotany

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sunjiutong at 2017-01-12 01:04:47
你说的有一定道理,但是,若真做qRT_PCR,你拿什么作为参照呢?

如果是遗传转化得到后代苗子,如T1代烟草和拟南芥,可以选择植物自身的内参,如果是瞬时表达,是否可以使用启动子部分作为内参?
5楼2017-01-12 18:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunjiutong

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by xdbotany at 2017-01-12 18:52:48
如果是遗传转化得到后代苗子,如T1代烟草和拟南芥,可以选择植物自身的内参,如果是瞬时表达,是否可以使用启动子部分作为内参?...

野生型植物基因组当中又没有GUS基因,你怎么选择内参?你以为启动子本身可以作为内参啊?启动子又不转录,怎么做荧光定量的内参????小弟,分子生物学学的不过关啊,要加油。
所谓梦想,只有醒来才有可能实现
6楼2017-01-13 11:23:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xdbotany

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by sunjiutong at 2017-01-13 11:23:37
野生型植物基因组当中又没有GUS基因,你怎么选择内参?你以为启动子本身可以作为内参啊?启动子又不转录,怎么做荧光定量的内参????小弟,分子生物学学的不过关啊,要加油。...

感谢你的指点,非常受益。我的意思是T1代苗使用植物自身内参,野生型没有GUS基因不是可以做阴性对照吗?我没太明白你的意思,麻烦你说详细一点,非常感谢。还有我也是考虑到启动子不转录,才觉得可以用作内参,相对来说启动子的数量是个定值,获得GUS基因的转录量与启动子自身的数量的比值就OK了,然而我忘了一个是在转录水平,另个在基因组水平,衰。非常感谢你的指点。
7楼2017-01-15 11:09:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Nila轶

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by xdbotany at 2017-01-15 11:09:42
感谢你的指点,非常受益。我的意思是T1代苗使用植物自身内参,野生型没有GUS基因不是可以做阴性对照吗?我没太明白你的意思,麻烦你说详细一点,非常感谢。还有我也是考虑到启动子不转录,才觉得可以用作内参,相对 ...

你好,我想问一下,启动子做定量pcr 时,如何根据gus 基因设计引物

发自小木虫IOS客户端
8楼2020-05-27 15:36:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Nila轶

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xdbotany at 2017-01-11 23:58:32
谢谢你的回答,再多问一句,我觉得研究启动子活力的时候,是不是做GUS基因的qRT-PCR更能真是反映启动子的活力呢?因为GUS基因转录量直接和启动子启动能力大小相关,而蛋白是转录后再翻译的,蛋白合成的因素受很多因 ...

染色验证这个,可以直接做T1代植株,还是多种几代后染色才正确

发自小木虫IOS客户端
9楼2020-05-27 15:38:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xdbotany 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +10 大馋小子 2026-03-28 10/500 2026-03-29 23:35 by 飞行日记西
[考研] 材料专硕调剂 +5 椰椰。 2026-03-29 5/250 2026-03-29 20:50 by 唐沐儿
[考研] 275求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 20/1000 2026-03-29 20:44 by 唐沐儿
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +17 稻妻小编 2026-03-26 17/850 2026-03-29 19:07 by 学员8dgXkO
[考研] 考研调剂 +7 小蜡新笔 2026-03-29 7/350 2026-03-29 19:00 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +4 笃行致远. 2026-03-28 4/200 2026-03-29 11:55 by longlotian
[考研] 332求调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 348求调剂 +5 小懒虫不懒了 2026-03-28 5/250 2026-03-29 10:34 by 唐沐儿
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 287求调剂 +10 land xuxu 2026-03-26 10/500 2026-03-27 15:33 by 帕尔马拉特
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分,英语已过四六级,六级521,求调剂 +4 美味可乐鸡翅 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:27 by 星空星月
[考研] 085600,材料与化工321分,求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
信息提示
请填处理意见